大蒜素制剂对人胰腺癌细胞Capan-1生长增殖作用的体外实验研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:na2222222
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[目的]:观察研究大蒜素制剂(Allicin)对体外培养的人胰腺癌细胞株Capan-1生长增殖的影响及其对Capan-1细胞周期的作用,以及细胞体外迁移能力的影响,为大蒜素制剂用于临床胰腺癌的治疗提供实验依据。[方法]:1测定体外培养的人胰腺癌细胞株Capan-1的细胞活力、贴壁率,应用四唑盐比色法(MTT)测定Capan-1细胞在不同时间、不同浓度的OD值,绘制生长曲线,确定最佳细胞接种浓度及药物干预区间。2.四唑盐比色法(MTT)测定不同浓度,不同作用时间的大蒜素制齐(Allicin)对人胰腺癌细胞株Capan-1的生长增殖抑制作用,测定其IC50,并于倒置显微镜下观察细胞形态学变化。3.流式细胞术检测大蒜素制剂(Allicin)对Capan-1细胞周期的影响并分析证实是否有诱导凋亡的作用;细胞划痕实验检测大蒜素制剂(Allicin)对人胰腺癌细胞株Capan-1株迁移能力的影响。[结果]:1.人胰腺癌细胞株Capan-1常规培养,存活率均>95%符合本实验要求,MTT测定的生长曲线提示按照6×103/孔的密度接种于96孔板内可提供足够的细胞生长空间及营养成分,使细胞于接种24小时后,适应新环境,逐渐进入快速繁殖期。2.选取6×103/孔浓度Capan-1细胞接种于96孔板后的24—72小时左右作为药物干预实验区间,该区间能够保证细胞始终处于一个稳定的对数生长期;在此条件下MTT法检测不同浓度大蒜素制剂对Capan-1细胞生长抑制率具有时间和剂量依赖性。3.流式细胞术检测结果显示大蒜素制剂可使Capan-1细胞周期阻滞于G2/M期,抑制细胞有丝分裂的进程,同时可见典型的亚二倍体峰即凋亡峰(AP)出现;TUNEL凋亡实验进一步证实大蒜素制剂能诱导Capan-1细胞凋亡的发生;细胞划痕实验结果显示大蒜素制剂能够明显降低人胰腺癌Capan-1细胞的迁移能力。[结论l:本实验结果示:1.不同浓度大蒜素制剂(Allicin)作用不同时间对人胰腺癌细胞Capan-1生长增殖具有明显的抑制作用,呈时-效和量-效依赖关系,具有时间依赖性和剂量依赖性。2.大蒜素制剂(Allicin)能诱导人胰腺癌细胞Capan-1凋亡,并将细胞周期阻滞于G2/M期,从而抑制细胞的分裂增殖。3.大蒜素制剂能够明显降低人胰腺癌Capan-1细胞的迁移能力。4.大蒜素制剂(Allicin)可能是有前景的抑制胰腺癌细胞的药物。
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