柴胡在祖国医学中为常用药材,用量较大,应用历史悠久。功主清退虚热,用于发热身痛、寒热往来、疟疾、胸肋胀痛、脏器脱垂、月经不调、失眠多梦等。2010年版《中国药典》所载柴胡为伞形科植物柴胡Bupleurm chinense DC.或狭叶柴胡Bupleurm scorzonerifilium Wild的干燥根。是“大柴胡汤”、“小柴胡汤”、“柴胡桂枝汤”等方剂的主要组成药味,现代药理研究证实柴胡具有抗病毒、抗炎、解热镇痛、保肝利胆、防治癌症等作用,以柴胡为主制成的柴胡注射液、柴胡口服液、柴胡滴丸等广泛应用于临床,柴胡需求量日益增大,柴胡资源问题十分突出。柴胡属植物在我国境内有42种、17变种和7变型,主要分布于辽宁、甘肃、河南、山东、四川、河北、湖北、江苏、安徽等省份。许多地区把柴胡属的多种柴胡以药用柴胡出售或入药使用。柴胡传统药用部位为植物根部,但地区不同,柴胡的用药部位也不尽相同,例如南方地区常将柴胡全草或地上部分入药用。还有些地区将柴胡植物全草入药,目的在于充分利用药源。目前柴胡应用情况复杂,柴胡药材及其制剂质量无统一标准,现阶段许多研究者都以柴胡非药典品种的化学成分及药理作用作为考察重点,期望可扩大药源,在一定程度上缓解野生北柴胡资源不足的现状。因此对地方药材进行质量评价很有必要,也可以为下一步扩大柴胡药源或引种栽培提供理论依据。烟台柴胡BupLeururn chinense DC. f.vaanheurckii(Muell.-Arg.)Shan et Y.Li为山东省特有药材,是北柴胡的一个变种,只在小总苞片的形状和边缘颜色上与北柴胡出现细小的差异。分布于山东省烟台市的牙山、艾山、昆嵛山等地,生长于海拔200～950米的山坡草地,民间常把它作为正品柴胡应用,其茎叶部分作为治疗小儿肺炎制剂柴酮片(三门峡广宇生物制药有限公司)原料应用多年,疗效确切,提示烟台柴胡全株均可作为药用部位。目前尚无烟台柴胡全草质量评价的报道,其品种来源和质量尚不确定。本课题对烟台柴胡进行了四项实验性研究,为其开发、药用提供了理论依据。一、烟台柴胡生药学研究本课题采集了烟台柴胡原植物标本,并通过鉴定确定其品种；收集了药材样品,对其进行生药学特征研究和质量评价：主要包括性状、显微和理化鉴别、薄层鉴别。性状鉴别表明：烟台柴胡具有伞形科植物的共性特性,同时具有柴胡属植物特征性外观形态结构；显微鉴别结果显示,本品中木栓细胞、油细胞、薄壁细胞、螺纹导管、纤维等组织结构清晰可见；理化鉴别表明,烟台柴胡含有三萜皂苷、黄酮类、挥发油等成分；TLC鉴别表明,烟台柴胡含有柴胡皂苷a和柴胡皂苷d成分。二、烟台柴胡挥发油成分及其抑菌活性研究目的：研究烟台柴胡地上部分的挥发油成分及其抑菌活性。方法：水蒸气蒸馏法提取烟台柴胡地上部分挥发油,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,分析、鉴定挥发油的化学成分。采用滤纸片固相扩散法进行抗菌活性试验并采用平板连续稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)。结果：首次提取了烟台柴胡地上部分挥发油,成功鉴定出30种化合物,并对其抑菌作用进行了研究,发现其具有广谱抗菌性。结论：烟台柴胡地上部分挥发油主要成分为萜类化合物和低分子脂肪烃类化合物,其对供试菌的抑菌强度由大到小为金黄葡萄球菌>桔青霉>大肠杆菌>白色葡萄球菌>枯草芽孢杆菌>黑曲霉>黄曲霉。三、黄酮类成分含量测定目的：采用高效液相色谱测定烟台柴胡全草提取物中芦丁和槲皮素的含量。方法：Agilent C18(250mmx4.6mm,5μm)色谱柱,流动相：乙腈-水(含0.1%磷酸),采用梯度洗脱方法,流速：1.0mL/min;检测波长：360nm。结果：芦丁和槲皮素在线性范围10～100μg/mL内,r分别为0.9999和0.9997,平均回收率分别为100.47%(RSD1.34%)和99.50%(RSD0.41%)。结论：该方法简便、快速、准确,适用于烟台柴胡全草提取物中芦丁和槲皮素的含量测定。四、皂苷类成分含量测定目的：建立烟台柴胡中柴胡皂苷a、d含量的HPLC法测定方法,研究烟台柴胡中柴胡皂苷a、d的含量。方法：采用Thermo ODS2HYPERIL(250×4.6mm,5μm)色谱柱；流动相为乙腈和水,梯度洗脱；流速：1mL·min-1;柱温：室温；检测波长：210nm。结果：方法学考察表明柴胡皂苷a、d的峰面积积分值和进样量的线性关系良好(ra,d=0.9999),精密度实验的RSD分别为0.67%和0.75%；加样回收率分别为99.4%和98.7%。测定的6种不同来源的烟台柴胡中柴胡皂苷a、d的含量相当,总量在0.772%～1.079%之间。结论：该方法稳定,重现性好,操作简单,可用于烟台柴胡的质量控制。烟台柴胡中柴胡皂苷a、d含量高于药典规定的柴胡标准,为烟台柴胡的应用提供了实验依据。通过对烟台柴胡生药学及化学成分的研究,对烟台柴胡的质量控制有了初步的评价,为烟台柴胡开发利用、引种栽培等方面提供了理论依据,有利于扩大柴胡的新药源。本论文的创新点：(1)首次进行了烟台柴胡的生药学实验。(2)首次对烟台柴胡的挥发油、黄酮和皂苷类化学成分进行了含量测定。(3)初步制定了烟台柴胡的质量标准,为其开发利用提供理论基础。