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胚胎干细胞(Embryonic stem cell, ESC)的应用已经在医学、基础研究领域和商业化市场被认可,这些都归因于ESC多潜能性和自我更新的特点。本实验结合国际ESC最新研究进展,在本实验室前期对绵羊类胚胎干细胞(Ovine embryonic stem-like cell, oESC-like)建系的基础上,对不同发育阶段的绵羊囊胚建系,并且在后期培养过程中分别添加白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor, LIF)和碱性成纤维细胞生长因了(Basic fibroblast growth factor, bFGF)观察这2种细胞因子对oESC-like增殖,凋亡以及多能性候选基因表达量的影响。本实验主要研究结果如下：利用相同分离方法对绵羊体外培养所得的不同发育阶段囊胚(早期囊胚、扩张囊胚、孵化囊胚)进行分离,所获得原代oESC-like率分别为：早期囊胚19.6%(3/12)、扩张囊胚37.5%(27/72)、孵化囊胚25%(3/12)(P<0.01)。并且碱性磷酸酶检测结果都呈阳性。在oESC-like培养过程中分别添加LIF和bFGF细胞因子,通过检测生长5天oESC-like的增殖和凋亡发现,bFGF组的oESC-like增殖速度与其他三个实验组差异极显著(P<0.01),而人源LIF (Human leukemia inhibitory factor, hLIF)、小鼠LIF (Mouse leukemia inhibitory factor, mLIF)和对照组(N2B27)的oESC-like增殖差异不显著(P>0.05)；在凋亡检测方面LIF和bFGF差异不显著(P>0.05)。利用Real-time PCR技术对其多能性基因检测发现,LIF对oESC-like多能性候选基因SOX2表达有上调作用(P<0.01),而OCT4的表达显著降低(P<0.01),并且mLIF与hLIF这两种不同种属的细胞因子对oESC-like多能性候选基因的调节无差异(P>0.05)；但是bFGF使oESC-like多能性候选基因SOX2和OCT4的表达量上调(P<0.01)。