双侧颈内动脉结扎介导的小鼠眼缺血综合征视网膜缺血损伤研究

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目的建立新的眼缺血综合征(Ocular ischemic syndrome,OIS)动物模型,并在该模型上探索OIS的分子机制。CRMP2在缺血缺氧损伤中起着关键作用,该实验探究其在OIS视网膜缺血损伤过程中的调节机制。方法结扎C57/BL6小鼠双侧颈内动脉制作OIS模型,缺血持续时间分别为1周、2周和4周。治疗组小鼠在结扎前向玻璃体腔内注射calpeptin后持续缺血4周。通过蛋白质印迹(Western Blotting,WB)和免疫组织化学检测(Immunohistochemical Analysis,IHC)方法来检测C RMP2在缺血模型视网膜中的表达。对小鼠进行眼底照相、荧光血管造影(Fundus Fluorescein Angiography,FFA)和视网膜电图(Electroretinogram,ERG)以评估缺血对视网膜血流及功能造成的损伤。并做HE染色来进行形态学检测视网膜各层厚度及视网膜神经节细胞(Retinal Ganglion Cell,RGC)数量的变化。结果缺血持续4周小鼠的视网膜静脉扩张,与对照组相比直径变大。缺血小鼠的视网膜电图a波和b波振幅随着缺血时间的延长呈递减趋势。FFA结果中,鼠尾静脉-视网膜循环时间在缺血1周和2周组明显延长,但在4周组恢复正常水平。而HE染色中视网膜厚度却随着缺血时间的增加而逐渐变薄。WB和IHC结果表明,CRMP2及其磷酸化水平在缺血2周和4周组明显减少。而在治疗组中视网膜厚度变薄及CRMP2含量减少均有所改善。结论双侧颈内动脉结扎可导致视网膜缺血损伤,且CRMP2在该缺血反应中可能起到重要作用。而使用CRMP2水解抑制剂可以减轻损伤反应。
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