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目的:
1.观察冠心病 (coronary heart disease,CHD) 患者血浆蛋白C(protein C,PC)活性,D-二聚体(D-dimer,D-D)、组织型纤溶酶原激活物(tissue type plasminogenactivator,t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物-1 (plasminogen activatorinhibitor,PAI-1)含量变化及与CHD严重程度的相关性。
2.观察CHD患者外周血单核细胞上 CD40 (cluster of differentiationantigen40)、CD40L(CD40 ligand,CDl54)的表达情况、血浆中sCD40L(solubleCD40 ligand,sCD40L)的水平及与CHD严重程度的相关性。
3.通过对CD40-CD40L系统的研究,对CHD的预防和治疗提供新的靶点。
4.观察血浆PC活性,DD、t-PA、PAI-1含量与CD40-CD40L系统各指标的相关性。
方法:
依据内科学第6版(叶任高、陆再英主编)<[1]>CHD的分型标准,将确诊为CHD的36例患者纳入研究:稳定型心绞痛(stable angina,SA)组16例,急性冠脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)组20例。健康对照组19例。三组间性别和年龄无显著性差异。取外周静脉血4ml,其中2ml用EDTA.K<,2>抗凝液抗凝,流式细胞术检测外周血单核细胞上CD40、CD40L的表达水平;2ml用柠檬酸钠抗凝液(1∶9)抗凝,提取血浆,用ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)方法测定血浆PC活性,D-D、t-PA、PAI-1含量及sCD40L浓度。统计学分析:所得的数据均用均数±标准差(x±S)表示,组间比较采用独立样本 t 检验,不同指标间的相关性用Pearson相关系数进行分析。
结果:
(1)ACS组、SA组患者血浆PC活性明显低于健康对照组(79.51±34.67%,80.4±42.57%vs 139.36±71.82%,P<0.01);
(2)ACS组、SA组患者血浆D-D含量明显高于健康对照组(0.52±0.28mg/L,0.46±0.23mg/L vs 0.18±0.1mg/L,P<0.01);
(3)ACS组、SA组患者血浆t-PA含量明显高于健康对照组(18.51±7.84ng/ml,16.22±8.24ng/ml vs 8.93±3.77ng/ml,P<0.01);ACS组患者血浆PAI-1含量明显高于SA组、健康对照组(55.96±12.89ng/ml vs 46.1±13.24ng/ml,45.44±14.36ng/ml,P<0.05);
(4)ACS组患者外周血单核细胞上CD40的表达水平明显高于SA组、健康对照组(64.8±13.35%vs 52.64±20.73%,52.29±8.8%,P<0.05);
(5)健康对照组、SA组、ACS组三组间外周血单核细胞上CD40L的表达水平未发现有显著性差异(2.77±1.45%、3.05±1.39%、4.0+-4.27%,P>0.05);
(6)ACS组、SA组患者血浆sCD40L浓度明显高于健康对照组(0.68±0.47ng/ml、0.66±0.4ng/ml vs 0.42±0.21ng/ml,P<0.05);
(7)外周血单核细胞CD40与CD40L表达水平与血浆sCD40L浓度三者间进行Pearson相关系数分析,结果显示外周血单核细胞CD40与CD40L表达水平呈正相关(r=0.41,P=0.002);外周血单核细胞CD40表达水平与血浆sCD40L浓度呈正相关(r=0.367,P=0.006);外周血单核细胞CD40L表达水平与血浆sCD40L浓度间未发现有相关性。
(8)血浆PC活性,D-D、t-Ph、PAI-1含量与CD40-CD40L系统各指标间进行Pearson相关系数分析,结果显示除PAI-1外,其余三个指标与CD40-CD40L系统各指标间未发现有相关性。血浆PAI-1含量与外周血单核细胞CD40表达水平、血浆sCD40L浓度呈正相关(r=0.328,P=-0.014;r=0.401,P=0.002),而未发现与外周血单核细胞CD40L表达水平有相关性。
结论:
1.ACS、SA患者血浆PC活性明显降低,D-D含量明显升高,ACS患者PAI-1含量明显升高,提示患者抗凝功能下降,纤溶受抑制,对评估CHD的预后、指导治疗有一定的价值。
2.ACS患者外周血单核细胞上CD40表达水平明显升高、ACS、SA患者血浆中sCD40L 浓度明显升高,提示CD40-CD40L通路参与动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生、发展以及并发症的产生,可能与ACS的形成有关,对于CHD患者的病情判断或预后估计有一定意义。CD40-CD40L 系统有望成为检测ACS及斑块不稳定与否的敏感血液学指标,阻断CD40-CD40L信号途径可能成为防治AS的一个重要靶点。
3.血浆PAI-1含量与外周血单核细胞CD40表达水平、血浆sCD40L浓度呈正相关,原因可能与血小板的激活有关。