地衣芽孢杆菌缓解蛋鸡热应激的效果及机理研究

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本论文共包括四个部分。首先通过体外试验研究了所选地衣芽孢杆菌的生物学特性和益生特性;然后通过生产试验研究了日粮添加不同剂量的该菌对热应激蛋鸡生产性能、蛋品质和血液指标的影响,确定了最佳添加剂量;最后通过研究该菌对热应激蛋鸡肠道屏障功能和肠道微生物区系的影响探讨了该菌缓解蛋鸡热应激作用的可能机制。试验一地衣芽孢杆菌的生物学特性研究本试验研究了所选地衣芽孢杆菌的生长、耐酸和耐胆盐、抗菌及体外黏附特性。结果表明:该菌从第12 h进入对数生长期,持续至22 h。发酵液pH值先下降,后升高,溶氧浓度逐渐降低。pH 2作用3 h活性损失24%,pH 3和4则小于10%。0.3%胆盐作用3 h后存活率为89.1%。该菌的发酵产物对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的平板生长有明显抑制作用。该菌能黏附到肠道粘蛋白并抑制上述三种病原菌的黏附。试验二地衣芽孢杆菌对热应激蛋鸡生产性能、蛋品质和血液指标的影响热应激降低蛋鸡日产蛋率(2~9 d)、平均产蛋率和采食量;降低鸡蛋蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度和哈氏单位;提高蛋鸡血清IL-1、TNF-α、内毒素、ACTH和CORT水平;降低了FSH、LH和P水平(P < 0.05)。日粮添加1000 mg/kg地衣芽孢杆菌能提高热应激蛋鸡的日产蛋率(2、5、6和9 d)、平均产蛋率、采食量及鸡蛋蛋壳强度;降低血清IL-1、TNF-α、内毒素、ACTH和CORT水平,提高FSH和P水平(P < 0.05)。试验三地衣芽孢杆菌对热应激蛋鸡肠道屏障功能的影响热应激损伤蛋鸡肠道绒毛结构,降低回、盲肠绒毛高度和V:C值,增加盲肠隐窝深度;降低回、盲肠上皮内淋巴细胞数量和sIgA阳性面积,增加肥大细胞数量;短期热应激使盲肠杯状细胞数量增加;长期则使之减少;热应激降低蛋鸡回、盲肠occluding、claudin-1和盲肠EGF mRNA的表达量。(P < 0.05)。日粮添加1000 mg/kg地衣芽孢杆菌改善了热应激蛋鸡肠道绒毛结构,提高回、盲肠绒毛高度和盲肠V:C,降低盲肠隐窝深度;提高回、盲肠上皮内淋巴细胞数量和sIgA阳性面积,减少肥大细胞数量,稳定了杯状细胞数量;提高回、盲肠claudin-1和盲肠EGF mRNA的表达量(P < 0.05)。试验四地衣芽孢杆菌对热应激蛋鸡肠道微生物区系的影响肠道微生物V3区PCR产物的DGGE图谱显示各组条带组内相似度较低。热应激降低了回、盲肠的DGGE条带数、香浓指数、盲肠乳杆菌和双歧杆菌浓度,增加回、盲肠大肠杆菌浓度(P < 0.05)。日粮添加1000 mg/kg地衣芽孢杆菌增加热应激蛋鸡盲肠DGGE的条带数、香浓指数和乳杆菌浓度(P < 0.05)。5个共有和特异性条带分属于Lactobacillus reuteri、Enterococcus sp.、Escherichia coli、Clostridium perfringens和Lactobacillus johnsonii。
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