真菌DT06胞外多糖的提取及分散性研究

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Simplicillium lanosoniveum var tianjinienss Q.L.Dong(DT06)是单细胞蓝藻Chroococcus.sp.的共生真菌,它除了可以产生具有抑菌活性的抗生素还会产生一定量的胞外多糖。这种胞外多糖最突出的特点是能够使蓝藻细胞均匀分散而不是絮凝沉降。因此,本文对DT06胞外多糖的分散性和生物可利用性进行研究。此外,实验室前期在对真菌DT06的发酵过程进行计量学分析时,经碳平衡计算得知,DT06在发酵过程中除了产生一定量的胞外多糖,还会产生一种未知的中性产物,这种产物对多糖的产量造成一定的影响,因此本实验对此未知产物进行了初步表征。首先,真菌DT06胞外多糖的提取及纯化。发酵过程中采用产多糖最适培养基,即改良的沙氏培养基。发酵完成后,乙醇沉淀提取多糖,得到多糖浓度为3.47±0.30 g/L。其次,未知中性产物的初步表征。经多步除杂处理后的发酵液经过一定的化学方法检测,最终推测此物质为低元醇类。再次,对DT06多糖溶液的分散性进行表征。实验过程中,检测了多糖溶液对多种颗粒物质及微生物的分散性,以及多糖溶液的分散性对pH、温度及离子的稳定性。结果表明DT06多糖对颗粒物质和微生物细胞具有良好的分散性,尤其是对微藻细胞的分散性最为突出:0.3 g/L的多糖能够使4.0 g/L的绿藻细胞(干重)均匀分散长达两周。DT06多糖的分散性在pH 4-10、温度4-30°C以及K2HPO4、Na2SO4、NaCl和KCl存在的条件下保持稳定,但被较高浓度的Ca2+、Mg2+和Li+抑制。这三种离子抑制50%分散性的浓度分别为1、10和50 mM。最后,接种相同浓度的不同微生物(酿酒酵母菌、黑曲霉、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉)到以DT06多糖为唯一碳源的改良BG-11平板培养基内,观察不同微生物在培养基上的生长情况。结果显示,DT06多糖不能被酿酒酵母、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌降解而只能被黑曲霉和淡紫拟青霉缓慢代谢。由此也说明DT06多糖具有较低的微生物可利用性。DT06多糖不同于大多数微生物多糖所表现出的絮凝性,其独特的分散性使它在食品、药品、化妆品等方面具有潜在的应用价值。
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