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目的建立可靠的小鼠肌肉卫星细胞原代培养方法及鉴定技术。方法取新生小鼠后肢肌获得细胞悬液，经Percoll分离，结合差速贴壁法提纯肌肉卫星细胞。倒置显微镜观察，绘制细胞生长曲线，采用结蛋白、α-肌动蛋白免疫细胞化学方法鉴定肌肉卫星细胞。结果原代骨骼肌卫星细胞在开始分化前呈圆形，通过细胞分离、提纯后纯度为80％以上。在F10培养液内肌肉卫星细胞生长良好，1天后细胞逐渐贴壁生长，细胞较小，分布均匀，多呈圆形；3-6天增长旺盛；到7-10天可生长至单层成片约50％～70％；12-14天后肌肉卫星细胞增殖减缓。10-15天的卫星细胞结蛋白、肌动蛋白染色清晰。结论使用Percoll分离、差速贴壁法的培养可获得纯度较高的肌肉卫星细胞，而结蛋白、肌动蛋白免疫细胞化学染色是鉴定肌卫星细胞的有效方法。