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匍柄霉属(Stemphylium)是丝状子囊真菌中的一类重要真菌类群,许多丝状子囊真菌属、种中含有异源三聚体G蛋白(Heterotrimeric G proteins)因子,该类蛋白包括α,β,丫三个亚基,每个亚基可能由多基因编码,其中a亚基对性细胞识别、交配以及信息素的传导起关键调控作用。G蛋白α亚基具有连接细胞表面感受器与胞质效应蛋白的性能,扮演着信息转化器的角色,可激活信息素因子参与真菌异型细胞的有性过程。在自然界中,匍柄霉属真菌绝大多数是以无性态的形式存在,但其中也有一小部分存在有性生殖阶段。研究发现该属真菌交配型位点存在三种形式：只含有MAT1-1或只含MAT1-2还有就是MAT1-1和MAT1-2同时存在,MAT1-1发生倒置后与MAT1-2连接在一起。本研究选取匍柄霉属典型种(Stemphylium eturmiunum; EGS29-099)为试验材料,该种同时含有两个交配型基因MAT1-1和MAT1-2,为同宗配合,该种在CM培养基上,25℃条件下,光照/黑暗交替培养,可诱导产生有性态,有性态发育特性为产生黑色的子囊壳及子囊孢子。为了深入研究匍柄霉属典型种(Stemphylium eturmiunum)中G蛋白α亚基基因的功能及对其有性态产生的影响,本研究对其G蛋白α亚基中的一个基因GPA1进行了敲除并回补,建立了农杆菌介导的遗传转化体系。对匍柄霉属典型种(Stemphylium eturmiunum)中的GPA1基因与有性态产生的关系进行了初步探索。我们是以匍柄霉属典型种(Stemphylium eturmiunum)为实验材料(现保存于山东农业大学真菌及真菌资源利用研究室),主要研究内容包括根据已报道的G蛋白α亚基基因信息,设计简并引物扩增匍柄霉典型种(Stemphylium eturmiunum)的G蛋白α亚基基因(GPA1)；通过Tail-PCR扩增获得GPA1基因的左右侧翼序列。构建了GPA1基因敲除及回补载体。建立了根癌农杆菌介导的遗传转化系统。获得了敲除及回补转化子。将野生型菌株,敲除转化子和回补转化子同时在有利于产生有性态的条件下诱导,发现敲除转化子不能形成成熟的子囊壳及子囊孢子,菌丝的生长较野生型的缓慢,产孢量明显减少,而野生型菌株和回补转化子经诱导均能够产生成熟的子囊壳以及子囊孢子,菌丝生长速率及产孢量均没有明显的差异。匍柄霉属典型种(Stemphylium eturmiunum)G蛋白α亚基基因(GPA1)的敲除载体和回补载体的构建以及农杆菌介导的遗传转化系统的建立,为深入研究匍柄霉属典型种(Stemphylium eturmiunum)的其他基因打下良好基础。