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目的 建立关节软骨非全层损伤动物模型并研究损伤造成的软骨组织和细胞变化。方法选取45只10周龄雄性SD大鼠,重300g～400g,随机分为三组:手术组、假手术组和对照组,每组各15只。对手术组大鼠,利用眼科手术刀片在右膝关节股骨髁负重区软骨面上以平行于关节活动的方向作2道划痕,深度以未见出血为止;对假手术组大鼠,在打开膝关节囊后直接缝合;对照组大鼠不行手术。术后所有大鼠皮下注射BrdU(1ml/天),连续三天。在术后1d、7d、14d各组分别处死5只大鼠。取材观察软骨大体表现,制备病理切片,行HE染色、番红0染色,运用改良组织学评分评价软骨修复情况,并用Image J软件分析番红0染色的灰度值。开展TUNEL免疫组化染色评价软骨细胞坏死。分别开展BrdU、CD105免疫荧光染色以及CD105/整合素β 1双标记免疫荧光染色评价软骨损伤部位周围的细胞特征。结果 术后所有大鼠均能自由活动,无大鼠死亡。手术组划痕周围软骨欠光滑,有软化和纤维化改变,随造模时间延长程度加重,符合骨关节炎早期特征;假手术组和对照组无软骨软化和纤维化改变。HE染色显示手术组划痕周围有细胞簇集现象,大小不等,排列分布不均;假手术组和对照组细胞大小均一,排列有序。术后各时间点手术组HE染色改良组织学评分均显著高于假手术组及对照组(P<0.05),各组组组内各时间点的组织学评分无明显差异(P>0.05)。番红0染色显示手术组染色欠均匀,划痕周围区域着色较浅;假手术组和对照组染色较均匀。就番红0染色灰度值而言,术后同一时间点三组对比以及各组组内各时间点比较均无明显差异(P>0.05)。TUNEL免疫组化染色显示划痕底部有较多棕褐色阳性坏死细胞。CD105免疫荧光染色显示手术组划痕周围聚集较多阳性细胞,大小不一、分布不均;假手术组和对照组仅在软骨表层有少量阳性细胞。术后同一时间点手术组的CD105阳性细胞数均显著多于假手术组和对照组(P<0.05);且手术组14d与7d比较,以及7d与1d 比较,CD105阳性细胞数也显著增多(P<0.05)。BrdU免疫荧光染色显示14d后手术组划痕周围仍然聚集较多标记滞留细胞,假手术组及对照组无此现象。CD105/整合素β1双标记免疫荧光染色显示划痕周围存在大量免疫双标阳性细胞,呈黄绿色强荧光。结论 运用刀片划痕法可以成功建立关节软骨非全层损伤动物模型。损伤的软骨符合早期骨关节炎特征,损伤不能自行修复。在损伤部位周围出现BrdU标记滞留细胞簇集现象,这些细胞能够表达干细胞标志物CD105,以及与细胞迁移与粘附功能密切相关的整合素β 1,可能是软骨前体细胞。