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目的:不均一性核糖核蛋白K(hnRNP K)是hnRNPs家族的一员,hnRNPs家族由一类多功能的蛋白家族分子组成,它能够调节转录、RNA选择性剪接、翻译、翻译后修饰和细胞信号转导等活动。此外,大量研究表明hnRNP K在多种肿瘤细胞中表达异常,且与肿瘤的发生发展、分期、耐药等密切相关。我们前期研究证实,hnRNP K在胃癌中高表达,且hnRNP K高表达与患者预后不良相关,但hnRNP K在胃癌中的作用尚不清楚,本研究通过敲低胃癌细胞hnRNP K蛋白表达,从增殖、迁移、侵袭、耐药等多个方面研究hnRNP K对胃癌细胞的影响。方法:本研究通过细胞免疫荧光检测hnRNP K在细胞中的定位,Western Blot检测hnRNP K及相关分子在胃癌细胞中的表达情况。构建hnRNP K干扰载体,RNA干扰方法敲低人胃癌SGC-7901中hnRNP K表达。通过MTT实验、划痕实验、Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验等多个实验检测hnRNP K对胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭、耐药等方面的影响,从而研究hnRNP K在胃癌中的作用。结果:1.细胞免疫荧光实验发现hnRNP K在SGC-7901细胞中主要位于细胞核,细胞质中有少量表达。而hnRNP K仅在GES-1细胞的细胞核中有表达,其细胞质中几乎没有表达。2.Western Blot实验证实hnRNP K shRNA 3对于hnRNP K干扰的效率最高。3.通过转染实验发现hnRNP K干扰组与未处理组、空质粒组相比细胞数目明显减少,差异具有用统计学意义(p<0.05)。且增殖抑制能力与shRNA量成正比,这提示hnRNP K能够促进胃癌细胞的增殖。4.MTT结果显示:hnRNP K干扰组与空质粒组、未处理组相比,生长速度明显减慢,活细胞数量增长不明显,增殖能力明显减弱(P<0.05),差异有统计学意义,空质粒组与未处理组无明显差异,差异不具有统计学意义(p<0.05),这进一步表明hnRNP K能够促进胃癌细胞的增殖。5.划痕实验结果显示:空质粒组及未处理组两组相比细胞迁移距离明显大于hnRNP K干扰组。差异具有统计学意义(p<0.05)。空质粒组和未处理组相比细胞迁移距离相差不大,差异不具有统计学意义(p<0.05)。6.迁移实验结果显示:hnRNP K干扰组与空质粒组及未处理组相比,迁移细胞数较少,差异具有统计学意义(p<0.05)。空质粒组与未处理组相比迁移细胞数相比相差不大,差异不具有统计学意义(p<0.05)。7.侵袭实验结果显示:hnRNP K干扰组与空质粒组及未处理组相比,侵袭细胞数较少,差异具有统计学意义(p<0.05)。空质粒组与未处理组相比侵袭细胞数相差不大,差异不具有统计学意义(p<0.05)。8.SGC-7901细胞与耐顺铂SGC-7901(SGC-7901/DDP)在细胞形态上具有一定的差异。SGC-7901/DDP细胞呈多边形,且细胞质更丰富。SGC-7901细胞多边形近梭形,细胞质相对较少。9.免疫荧光实验发现hnRNP K在人胃癌SGC-7901/DDP细胞的细胞核和细胞质中皆有较多表达,而hnRNP K在人胃癌SGC-7901细胞系中虽然细胞核、细胞质也均有表达,但表达量较SGC-7901/DDP细胞低,且胞浆分布更低。10.通过Western Blot实验发现hnRNP K在胃黏膜GES-1细胞中的表达相比人胃癌SGC-7901细胞与人胃癌SGC-7901/DDP细胞低,差异具有统计学意义(p<0.05)。而hnRNP K在人胃癌SGC-7901细胞中的表达相较于人胃癌SGC-7901/DDP细胞低,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:1.敲低hnRNP K可抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖、迁移与侵袭。2.hnRNP K在SGC-7901/DDP细胞表达升高,且胞浆分布增多,提示hnRNP K与人胃癌SGC-7901细胞耐药相关。