人白细胞介素-6重组菌培养条件研究及代谢通量模型分析

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该文研究了培养条件对大肠杆菌pop2136和JM109两种不同的人白细胞介素-6表达系统的影响.培养基中葡萄糖和有机氮源浓度对两种表达系统中人白细胞介素-6表达的影响不同,在pop2136表达系统中诱导后补加有机氮源对目标蛋白表达量的影响不大,在JM109表达系统中有机氮源浓度提高有利于菌体的生长和目标蛋白的表达.培养基中葡萄糖浓度超过1g/L,JM109的生长和目标蛋白的表达都受到抑制,对于JM109表达系统较优的在培养基为含有1g/L葡萄糖的2×YT培养基.建立了大肠杆菌的代谢通量模型,通过计算发现在较高的比生长速率下菌体氧化磷酸化代谢能力的限制导致乙酸的产生.分析了外源蛋白的表达对胞内代谢流分布计算的影响,在外源蛋白表达量较高时,忽略外源蛋白表达会给胞内代谢通量分布的计算带来较大误差.
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