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柴胡作为我国传统常用中药,药用历史悠久。在2015年版的《中华人民共和国药典》中收录的柴胡原植物有两种,即北柴胡(Bupleurum chinense DC.)和狭叶柴胡(Bupleurum scorzonerifolium Willd.)。柴胡苦辛微寒,具有解热、退热、抗菌、抗病毒、解除胸闷胀痛的作用。柴胡属植物广泛分布在我国各地,除海南省未见报道外,其他各省均有柴胡属植物分布,近些年来,四川广元和绵阳已逐渐成为柴胡的主要产地。本研究分析了川产北柴胡中柴2号中柴胡皂苷、黄酮、多糖等成分含量并建立中柴2号的HPLC和GC指纹图谱,为中柴2号药材质量评价、品种鉴别及其入药提供科学依据。主要结果如下:通过对中柴2号样品预处理条件、检测条件、洗脱条件的优化,流动相、色谱柱的选择,确定了柴胡皂苷与黄酮类成分测定的最终色谱条件为Hypesil GOLD色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B);梯度洗脱程序(0~5 min,10%A~30%A;5 min~25 min,30%A~70%A);流速为0.8 m L·min-1;柱温检测为常温(30oC),进样量10μL,运行时间25 min,检测波长210 nm。采用HPLC法测定中柴2号中皂苷与黄酮类成分,结果发现中柴2号地下部分中含有柴胡皂苷a、柴胡皂苷c和柴胡皂苷d,且柴胡皂苷a和柴胡皂苷d含量总和均大于0.30%,高于2015年版《中国药典》柴胡药材含量测定项下的最低限度规定,最高可达1.01%;地下部分仅含有少量的黄酮类成分。中柴2号地上部分中含有少量柴胡皂苷a和柴胡皂苷d,其和最高为0.10%;地上部分含有较多的黄酮类成分,其含量最高为0.68%。采用紫外-可见分光光度法测定中柴2号中总皂苷、总黄酮和多糖含量,结果发现中柴2号地上部分柴胡总皂苷含量为0.26%~0.82%,总黄酮含量为0.81%~2.76%,可溶性多糖含量为0.996~3.859 mg·g-1,粗多糖含量为6.032~10.632 mg·g-1,总多糖含量最高可达12.837 mg·g-1。地下部分柴胡总皂苷含量为1.05%~2.12%,总黄酮含量为0.18%~0.46%,可溶性多糖含量为2.118~13.809 mg·g-1,粗多糖含量为7.153~20.257 mg·g-1,总多糖含量最高可达28.992 mg·g-1。中柴2号地上部分总皂苷含量在8、9月份达到最高值,10、11月份总皂苷含量降低,地下部分在总皂苷含量在7、8月份达到最高值,9、10、11月后总皂苷含量逐渐降低;中柴2号地上部分总黄酮含量在8、9月份达到最高值,10、11月份逐渐降低,中柴2号地下部分总黄酮含量在7、8月份达到最高值,9、10、11月后逐渐降低;中柴2号地上部分及地下部分总多糖含量从7月份至11月份基本呈上升趋势。10批中柴2号样品HPLC及GC色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》,HPLC指纹图谱匹配10个共有峰并确定柴胡皂苷a、柴胡皂苷c和柴胡皂苷d三个有效成分,共有峰相对保留时间RSD值在0.18%~0.70%之间,共有峰相对峰面积RSD值在20.95%~101.05%之间;GC指纹图谱匹配12个共有峰,共有峰相对保留时间RSD值在0.04%~0.32%之间,共有峰相对峰面积RSD值在20.67%~88.92%之间,结果表明10批柴胡主要成分基本相同,但各成分含量差异较大,即相同品种不同产区川产柴胡各化学成分的含量有明显差别。中柴2号HPLC指纹图谱相似度结果表明各批柴胡样品与对照指纹图谱的相似度在0.39%~0.97%之间,其它各样品间的相似度在0.05%~0.95%之间;中柴2号GC指纹图谱相似度结果表明各批柴胡样品与对照指纹图谱的相似度在0.76%~0.99%之间,其它各样品间的相似度在0.33%~0.98%之间。虽然各批柴胡样品基源相同,但由于生长环境不同,指纹图谱相似度也有所不同。本课题通过对四川种植基地10批柴胡中柴2号指纹图谱的研究,建立了川产柴胡中柴2号HPLC与GC指纹图谱分析方法,将中柴2号柴胡皂苷成分与挥发油成分的共有峰信息分别在GC与HPLC图谱中展现,更全面科学的对药材质量进行评价,该方法简单易行,重现性好,为川产柴胡药材的品质监控提供了一定的科学依据。