构树(Broussonetia papyrifera L.)是一种速生阔叶树种，落叶乔木，桑科，构树属。该树种适应性强，生长周期短，伐后可萌生。构树是一种具有极高经济价值的多功能树种，其树皮用于生产特种纸，树干用于造纸和制作纤维板，树叶是优良饲料。本文以优良构树品种——杂交构树的叶片作为外植体，从外植体消毒，愈伤组织诱导，不定芽分化以及生根培养等方面进行了研究，初步建立了杂交构树叶片的再生体系。同时采用EMS对杂交构树叶片进行化学诱变，并对诱变处理后的叶片进行植株再生，旨在获得矮化突变体，为培育杂交构树新品种奠定一定的理论和技术基础。并且通过农杆菌介导的方法，将9-顺式环氧类胡萝卜素双加氧酶基因SgNCED和阿拉伯糖醛酸内酯氧化酶基因ALO导入杂交构树，并获得了相应的转基因植株。主要研究结果如下：　　 1.杂交构树叶片再生体系的建立　　 杂交构树叶片的最佳消毒方法为先将采摘的叶片在自来水中用软毛刷反复刷洗并用流水冲洗30min，75％酒精消毒20s，无菌水冲洗3次，再用HgCl2消毒3min，无菌水冲洗5次，该方法能很好的控制污染并获得较高的成活率；叶片愈伤组织诱导最佳培养基为MS基础培养基添加1.5mg／L6-BA和0.05mg／LIBA，28℃±1℃黑暗培养3周左右愈伤诱导率能达到100%;将培养3周左右的愈伤组织更换新鲜培养基置于28℃±1℃光照培养能直接分化出不定芽，但是不定芽分化率较低，添加0.5mg／L的GA3能显著提高不定芽的分化率并促进不定芽的伸长生长；杂交构树不定芽生根比较容易，直接在MS培养基上就能诱导生根，但形成的根细长，数量少，较脆弱，添加0.2mg／L的NAA诱导产生的根粗壮，数量多，移栽成活率较高。　　 2.EMS诱导杂交构树矮化变异　　 设置不同的EMS浓度对杂交构树叶片进行诱变处理，结果表明EMS诱变杂交构树叶片的最佳剂量为0.5%EMS处理6h，致死率接近50%。经过EMS处理，愈伤组织的不定芽分化率下降，只有41.28%。经诱变处理的再生植株已经移栽至试验田，对于诱变植株矮化变异的筛选还需要进一步的研究。　　 3.农杆菌介导的杂交构树基因转化　　 首先通过杂交构树对Basta敏感性的实验，确定了杂交构树在农杆菌介导的遗传转化中有效的Basta筛选浓度为2.0mg／L。经过Basta初步筛选，共获得了7株待检测抗性植株。以未转化植株为阴性对照，pCAM-SgNCED-ALO质粒DNA为阳性对照，SgNCED、ALO、bar基因的特异引物进行PCR扩增，部分植株扩增出与阳性对照一致的特异条带，这初步表明这些基因已经整合到这些植株的基因组DNA中。