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柯里拉京(Corilagin),是一种逆没食子酸鞣质,酚类化合物,分子式为C27H22O18,易溶于甲醇、DMSO等有机溶剂,在植物中广泛分布,其中主要分布在大戟科植物中。前人研究表明柯里拉京有多种生物活性,具有抗氧化、抗癌、抗炎、和保肝等多种生物活性,最近其抗癌活性是其生物活性研究热点。前期实验表明,柯里拉京会通过诱导肝癌细胞凋亡来抑制细胞生长,但对其分子机理不清楚。因此,本研究将着眼于柯里拉京诱导细胞凋亡的分子机理。Corilagin对肝癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用:通过MTT实验测得Corilagin对肝癌细胞SMMC7721、Bel7402、MHCC97-H的半抑制浓度IC50值分别为38.12±1.2、39.7±1.4和37.05±0.9μM。台盼蓝排斥实验和细胞集落形成实验结果表明Corilagin对肝癌细胞体外增殖有较好的抑制作用。通过AO/EB双染和Hoechst33258单染发现Corilagin能使肝癌细胞出现典型的凋亡特征,细胞变圆,核染色质皱缩。流式细胞仪检测表明在37.5μM作用浓度下Corilagin对肝癌细胞SMMC7721的晚期凋亡诱导率为24.1%。Corilagin对凋亡通路蛋白的影响:通过JC-1染色测线粒体膜电位,发现Corilagin能引起肝癌细胞SMMC721线粒体膜电位下降,Western blot检测发现细胞浆中细胞色素c的含量上升,同时还检测到了胞浆中Caspase-9、Caspase-3、PARP均发生剪切,表明Corilagin激活了细胞线粒体凋亡通路。此外,还检测到Bcl-2和Survivin的下调,p53的上调以及Caspase-8的激活。表明Corilagin还能通过上调p53来下调Survivin,最终弱化Survivin对Caspase-9和Caspase-3活性的抑制作用以及下调抗凋亡蛋白Bcl-2,共同促进线粒体凋亡通路的信号转导,增强Corilagin对肝癌细胞的凋亡诱导作用。