LKB1在甲状腺癌细胞中的作用

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研究目的基于精准医疗背景下,探讨LKB1在甲状腺癌细胞中的作用,为临床进一步诊治甲状腺癌提供新的分子依据。实验材料与方法通过免疫组化SP方法检测50例甲状腺癌和癌旁石蜡组织中LKB1的表达,结合已收集的50例甲状腺癌患者临床资料及病理特征,采用卡方检验,Fisher确切概率法,并进一步建多因素线性回归方程说明LKB1蛋白表达与甲状腺癌临床资料及病理特征的相关性。利用LKB1过表达质粒转染甲状腺癌细胞株,采用Western blot法检验甲状腺癌细胞LKB1过表达体系的建立。通过RT-PCR法检测LKB1过表达与血管内皮生长因子VEGF表达的相关性。收集条件培养基,通过小管形成实验观察LKB1过表达对人脐静脉血管内皮细胞HUVEC(human umbilical vein endothelial cells)的影响进一步说明 LKB1 对于肿瘤新生血管生成的影响。实验结果在甲状腺癌组织中LKB1高表达13例(低表达37例),高表达率为26%(13/50);在癌旁组织中高表达39例(低表达11例),高表达率为78%(39/50),两组间差异具有统计学意义(p<0.001),在甲状腺癌中LKB1高表达率显著低于癌旁组织。卡方检验,Fisher确切概率法,得出在甲状腺癌组织中LKB1的表达与肿瘤大小、包膜侵犯、淋巴结转移,差异有统计学意义(P<0.05),构建多因素线性回归方程,其中肿瘤大小(b=0.210 t=2.028 p=0.049),包膜侵犯(b=0.327 t=2.674 p=0.011),淋巴结转移(b=0.713 t=7.481 p=0.000)三者均是独立影响因素。RT-PCR法检测得出LKB1过表达与血管内皮生长VEGF表达呈负相关;小管形成实验实验结果显示LKB1抑制HUVEC的生成。实验结论LKB1在甲状腺癌组织中低表达,LKB1表达与肿瘤大小,包膜侵犯,有无淋巴结转移密切相关。甲状腺癌细胞中LKB1过表达对血管内皮生长因子VEGF有抑制作用。LKB1可能是预测甲状腺癌发生及复发,转移的重要指标,未来LKB1有可能为临床抗甲状腺癌治疗提供新的潜在靶点。
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