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背景与目的： 新生儿缺氧缺血性脑病是多种因素导致的新生儿脑损伤，由于脑组织缺氧缺血常遗留不同程度的永久性神经系统功能缺陷。目前临床上治疗方法有限，所以对患儿、家庭及社会造成较大的负担。因此，进一步研究新生儿缺氧缺血性脑损伤的发病机制，寻找新型、有效又安全的治疗药物或方法是我们要做的重要工作。利拉鲁肽已经在体内和体外研究中被多次证实具有良好的神经保护作用。然而，利拉鲁肽在新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中尚没有相关研究。本研究将观察利拉鲁肽是否对新生大鼠缺氧缺血后造成的脑损伤起到神经保护作用，以及探究其神经保护作用的机制。 方法： 1.动物模型制作 (1)分组：选择7日龄(P7)新生SD大鼠作为实验对象(P0=出生当日)，建立新生儿缺氧缺血性脑损伤模型。将58只动物随机分为三组：假手术组(sham组，n=16只)，缺氧缺血损伤组(HI组，n=21只)，利拉鲁肽治疗组(Lir组， n=21只)。另根据模型制作后的两个时间点24小时和7天，将各组分别随机分为2个小组。 (2)新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型制作：将生后7天的新生SD大鼠用3%异氟醚麻醉，游离暴露左侧颈总动脉后结扎并剪断。随后让新生大鼠回到母鼠身边恢复2小时，将缺氧缺血损伤组和利拉鲁肽治疗组置于密闭透明缺氧箱中，通入含8%氧气和92%氮气的混合气体进行缺氧，缺氧全程将缺氧箱放置于37.5摄氏度的恒温水浴箱中进行，持续2.5小时。缺氧结束后，将新生大鼠送回到母鼠身边。假手术组不予左侧颈总动脉结扎剪断，也不予缺氧处理，仅做游离暴露动脉处理。 (3)给药方法和途径：在模型制作完成后30分钟，利拉鲁肽治疗组予皮下注射利拉鲁肽生理盐水稀释液(200μg/kg)，24小时组给药两次，7天组予一天给药两次，共给药7天。假手术组和缺氧缺血损伤组同时予皮下注射相同药物体积的无菌生理盐水。 2.检测指标 (1)检测新生大鼠死亡情况及体重变化； (2)Longa评分法检测新生大鼠行为学变化情况； (3)解剖学观察脑组织大体变化情况； (4)干湿比法检测脑组织的含水量变化情况； (5)TTC染色法检测脑组织的缺血梗死情况； (6)HE染色法观察脑组织病理改变情况； (7)R-T PCR法检测大脑皮层部位炎症因子表达情况。 结果： 1.新生大鼠死亡情况及体重变化 制作模型过程中，Lir组因动脉结扎不牢死亡1只，HI组在缺氧过程中死亡1只，模型制作完成后均未出现死亡情况。 缺氧缺血性损伤后24 h，Sham组大鼠平均体重为[(21.35±0.54)g，n=4]，重于HI组平均体重[(19.63±0.80)g，n=5]，两组比较存在显著性差异，(t=3.651， P=0.0082)，Lir组大鼠平均体重为[(17.67±1.22)g，n=5]，较HI组轻(t=3.021，P=0.0165)；损伤后48 h，HI组平均体重为[(21.37±1.13)g，n=5]，重于Lir组平均体重[(19.06±1.24)g，n=5]，两组比较存在显著性差异，(t=3.081，P=0.0151)；损伤后7 d，HI组和Lir组大鼠平均体重分别为[(28.89±0.54)g，n=5]和[(29.10±1.12)g，n=5]，两者无显著性差异,P＞0.05。 2.Longa评分法检测新生大鼠行为学变化情况 缺氧缺血性损伤后24 h，Longa神经行为学评分显示，HI组评分为[(2.20±0.63)，n=10]，Lir组评分为[(1.60±0.52)，n=10)]，两组比较有显著性差异(t=2.324，P=0.032)。 3.解剖学观察脑组织大体变化情况 缺氧缺血性损伤后24 h，解剖学观察HI组脑组织，可见左侧大脑半球水肿明显，可见部分乳白色梗死病灶，和周边正常脑组织存在较明显分界；损伤后7 d，HI组左侧大脑半球表面有较大面积脑组织融缩、塌陷，部分液化。Lir组脑组织萎缩程度较HI组轻，脑组织损伤情况明显改善。 4.干湿比法检测脑组织的含水量变化情况 缺氧缺血性损伤后24 h，Sham组左侧大脑含水量为[(83.62±0.83)%，n=4]， HI组左侧大脑含水量为[(88.20±1.24)%，n=5]，两者比较有显著性差异(t=6.336， P=0.0004)；Lir组左侧大脑含水量为[(85.16±1.016)%，n=5]，与HI组比较具有显著性差异(t=4.261，P=0.0028)；三组右侧大脑含水量无显著差异，P＞0.05。 5.TTC染色法检测脑组织的缺血梗死情况 缺氧缺血性损伤后24 h，脑组织TTC染色法结果显示，HI组脑梗死体积为[(38.41±11.08)%，n=5]，Lir组脑梗死体积为[(21.97±6.68)%，n=5]，两者比较Lir组大鼠梗死体积较HI组减少(t=2.841，P=0.0218)，差异具有统计学意义。 6.HE染色法观察脑组织病理改变情况 缺氧缺血损伤后7 d，HE染色法示镜下Sham组大脑皮层结构完整，细胞排列有序，细胞核大，异常细胞少见；HI组损伤侧大脑皮层神经元排列紊乱，细胞变形，结构不清，大量细胞核固缩；Lir组细胞排列较HI组整齐，细胞结构较完整，细胞核固缩少。 7.R-T PCR法检测大脑皮层部位炎症因子表达情况 缺氧缺血损伤后24 h，大脑皮层部位炎症因子mRNA检测结果显示，HI组IL-1β、TNF-α、IL-6、iNOS和IL-18的mRNA表达量较Sham组明显增加；Lir组相对应的炎症因子表达量较HI组明显减少，两组比较有显著性差异(P＜0.05)。其中HI组皮层IL-1β、TNF-α、IL-6、iNOS和IL-18的mRNA表达量相对于Sham组分别升高了(2.37±0.50)倍、(2.91±0.60)倍、(4.67±0.39)倍、(3.83 ±0.66)倍、(3.42±0.59)倍，而Lir组相应因子相对于Sham组仅升高了(1.73 ±0.29)倍、(1.90±0.21)倍、(1.89±0.31)倍、(1.94±0.40)倍、(2.30 ±0.42)倍。 结论： 1.通过阻断生后7天的SD大鼠左侧颈总动脉和缺氧处理能成功制作新生大鼠缺氧缺血性脑损伤模型，经皮下予利拉鲁肽能改善新生SD大鼠神经行为缺陷。 2.利拉鲁肽能抑制缺氧缺血损伤后脑组织水肿，减少脑梗死体积，促进恢复脑组织形态学改变。 3.利拉鲁肽可能通过减少炎症因子表达水平，起到神经保护作用。