论文部分内容阅读
目的:研究18F-FDG双探头符合线路显像和同机CT融合技术在头颈部恶性肿瘤诊治中的价值,及葡萄糖转运蛋白在头颈部恶性肿瘤组织中葡萄糖吸收和利用增高中作用及其表达与头颈部癌的生物学行为之间的关系。 方法:2003年4月～2005年2月,我们用18F-FDG双探头符合线路显像和同机CT融合技术检查25例头颈部肿瘤,并与解剖显像结果相比较。所有病例均在3周内行CT/MRI解剖显像和18F-FDG双探头符合线路显像。全部患者检查后随访4个月～20个月。结果判断:由2位以上核医学科医生进行目测双盲阅片,正常部位（心脏、肾脏和膀胱等）以外出现异常放射性浓聚判断为恶性肿瘤病灶或复发转移灶。 2003年1月～2005年1月,我们收集38例无糖尿病史在耳鼻咽喉科、口腔外科住院的头颈部癌的新鲜组织标本包括21个正常组织、20个癌旁组织、38个肿瘤组织,所有标本剔除坏死组织,液氮冷冻,-80℃冰箱里冷藏。实验时解冻。RT-PCR:-80℃冰箱里冷藏的标本解冻,切取25毫克标本,美国QIAGEN浙江大学博士学位论文公司Rneasy Mini klt常规提取总RNA,以p一肌动蛋白（p一actin）作为内对照,方法采用QIAGEN公司提供的一步法Rl飞PCR kit进行聚合酶联反应扩增。PCR反应条件:95℃预变性3 min:94oC变性305,60℃复性305,72oC延伸1 min,扩增35个循环:72℃延伸10 min。取10川PCR产物电泳,用数码凝胶图像分析系统（Kodak EDAs290）作条带密度扫描。结果以目的条带与对应的p一 actin密度比值表示作半定量分析。 免疫组化方法:上述21个正常组织、20个癌旁组织、38个肿瘤组织冰冻标本进行解冻,石蜡包埋,应用标准链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶亲和免疫组化方法染色。多克隆兔抗人Glut一1、Glut一3抗体浓度1:400。对Glut一1,同一标本正常组织切片染色为阴性对照;同一切片内红细胞为阳性内对照,纤维细胞为阴性内对照。对Glut一3,同一标本正常组织切片染色为阴性对照,同一切片内炎症细胞为阳性内对照。两者同时设立不加多克隆兔抗人Glut一1、Glut一3抗体（T BS代替）的染色组为阴性对照。结果: 1 .25例患者’“F一FDG双探头符合线路显像和同机cT融合技术检查结果: 25例患者中阳性者18例:17例阳性,假阳性1例;7例阴性:2例为鼻咽癌放疗后、1例为甲状腺癌术后,2例为上领窦癌术后,3例为喉癌术后,分别随访4月一20月后未见复发。本组中符合线路显像及图像融合诊断灵敏度、特异性和准确性分别为100.0%（17/17）、88.9%（8/9）、96.04%（24/25）;解剖显像（CT从Rl）诊断灵敏度、特异性和准确性分别为64.7%（11八7）、44.4%（4/9）、56.0%（14/25）。用四格表的确切概率法:符合线路显像及图像融合诊断灵敏度与解剖显像（CT乃姓Rl）诊断灵敏度之间有显著性差异（P=0.009）;经xZ检验:符合线路显像及图像融合诊断特异性与解剖显像（CT侧Rl）诊断特异性之间有显著性差异（P<0.05）,符合线路显像及图像融合诊断准确性与解剖显像 （ CT乃涯班）诊断准确性之间有显著性差异（P<0 .05）。浙江大学博士学位论文 2.’“F一FDG符合线路显像及图像融合显示及诊断恶性病灶的效能: 在同部位的FDG符合线路显像及图像融合与解剖CT/MRI显像比较中,解剖显像不能对颈部转移淋巴结癌的原发灶及良恶性作出正确判断的8例患者,符合线路显像及图像融合均能作出正确判断。’SF一FDG符合线路显像及图像融合能发现额外病灶,在检查的18例患者中,解剖显像发现25个病灶,符合线路显像发现48处,较解剖显像多23个病灶,解剖显像显示的远处转移1处,符合线路显像FDG无吸收增多,提示无转移。’SF一FDG符合显像与cT影像融合可准确地从解剖学角度评估’SF一FDG在上述生理性和异常FDG浓聚。 3.正常组织、癌旁组织、癌组织中Glut-l基因的表达与卜actin的比值分别为: 0.4342、0.4823、0.9185,癌组织与癌旁组织、正常组织相比,T值分别为10.185、9.778（P<0.0001）,有显著性意义;正常组织、癌旁组织、癌组织中Glut一3基因的表达与p一aetin的比值分别为0,3576、0.4582、0.9816,癌组织与癌旁组织、正常组织相比,T值分别为7.324、9.114（P<0 .0001）,有显著性意义。Glut一l基因在鳞状细胞癌、腺样囊性癌的比值分别为0.9143、0.9942（P）0.05),在高/中分化、低分化中的表达分别为0.8807、0.9705（P>0 .05）,在有淋巴结转移、无淋巴结转移的头颈部癌中的表达分别为0.9923、0.7921（P<0.001）,在临床分期（I+11）、l愉床分期（111+W）中的表达分别为0.8282、0.9982 （P（0.001）;Glut·3基因在鳞状细胞癌、腺样囊性癌的比值分别为0.9867、0.8891（P）0.05）,在高/中分化、低分化中的表达分别为0.9975、0.9572（P）0.05),在有淋巴结转移、无淋巴结转移的头颈部癌中的表达分别为1.0430、0.8764 （P<0.001）,在临床分期（I+11）、I喻床分期（111+W）中的表达分别为0 .9571、1.0037（P）0.05)。 4.Glut一1、Glut一3蛋白在头颈部癌组织中的表达: Gkit一1在正常头颈部组织中仅在部分组织的基底层表达,在38例头颈部癌中30例有不同程度的表达,其中弱染色为10例,强染色为20例。Glut一1蛋白