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目的:掌握2007～2008年河北省流感流行情况;对新分离流感病毒株血凝素HA1基因进行分析比较,阐明基因变异与流感流行的关系;为疫苗株选择等流感防治工作提供科学依据。方法:1在2007年10月～2008年3月通过中国流感/禽流感监测信息系统,收集河北省流感样病例(ILI,influenza-like illness)监测数据,用Excel软件进行统计,分析ILI在人群中的流行变化趋势。2将来自监测哨点医院和流感暴发疫情的咽拭子标本用狗肾传代(MDCK)细胞培养和分离流感病毒,用豚鼠红细胞和流感病毒标准参考血清进行血凝抑制试验鉴定分型。在血凝抑制试验的基础上,选取不同时间、地域及型别的流感病毒14株。3提取病毒RNA,利用RT-PCR方法扩增出HA1基因片断,对扩增产物进行核苷酸序列测定,用DNAStar软件与近年流感流行代表株进行序列比较,分析其核苷酸序列和氨基酸序列的同源性及变异情况,以及变异对流感病毒抗原性改变的意义。结果:1 12所流感监测哨点医院ILI就诊百分比为3.12%,高峰出现在2008年第5周(5.07%)。儿科门诊ILI就诊百分比高于内科。2 2007～2008年流行期河北省流感监测哨点医院采集ILI咽拭子标本962份,分离出流感病毒79株。经分型鉴定,B型Yamagata系68株,B型Victoria系7株,H3N2亚型4株。3两起暴发疫情分别分离到2株B型Yamagata系流感病毒和4株H3N2亚型流感病毒。4抽取的14株新分离流感病毒株利用特异性引物,采用RT-PCR方法分别扩增HA1区基因片断,1.5%琼脂糖凝胶电泳后,均出现相应条带。5扩增的流感病毒HA1区基因片段进行核苷酸序列测定,并与近年疫苗株进行核苷酸序列、氨基酸序列及同源性比较。5.1 2008年H3N2分离株与2007年毒株A/河北新市/1255/2007相比,6个位点氨基酸发生同样的替换(3F> L, 45 S>N,158R>K,171N>K,173N>K, 304A>V),其中一个在抗原决定簇B区(158R>K),两个在在抗原决定簇C区(45S>N, 304A>V),两个在抗原决定簇D区(171N>K, 173N>K)。2008年分离的毒株与WHO推荐2007～2008年流感疫苗株A /Wisconsin/67/2005相比核苷酸同源性为98.0%、氨基酸同源性为97.0%,有10个氨基酸位点不同。进化树结果显示是2008～2009年流感疫苗株A/Brisbane /10/2007的类似株。5.2四株乙型Victoria系毒株与疫苗株B/Malaysia /2506 / 2004相比未发现核苷酸的丢失和插入,核苷酸同源性为98.8%～99.1%,氨基酸同源性为99.1%～99.4%,仅有一个位点(109N>K)发生了相同的氨基酸替换。5.3 Yamagata系毒株与同期疫苗株B/Malaysia/2506/2004不属于同一谱系,和2005～2006流行期疫苗株Yamagata系B/Shanghai/361/2002相比,核苷酸同源性为97.5%～97.8%,氨基酸同源性为97.4%～98.0%。有7个氨基酸位点(37T>V,40Y>H,48K>R,108A>P,131P>L,196N>D,251M>V)不同,其中131、196位氨基酸位于抗原决定区。结论:1 2007～2008年流感流行期河北省ILI就诊和毒株分离时间基本一致,高峰为2007年12月至2008年1月,B型Yamagata系流感病毒为优势毒株。2 H3N2亚型毒株基因变异较大,与疫苗株A / Wisconsin /67/2005相比,有10个氨基酸位点不同,是新变种,为2008～2009年流感疫苗株A/Brisbane /10/2007的类似株。3 B型Yamagata系毒株基因变异较大,抗原性发生了漂移,与疫苗株B/Malaysia/2506/2004不属于同一谱系,是造成局部爆发流行的主要因素。4 B型Victoria系毒株变异不大,与同期疫苗株疫苗株B/Malaysia/2506/2004类似,但持续在人群中流行。5监测流感病毒流行株HA1区的基因变异情况,可以为我们早期发现有流行病学意义的变异株提供帮助。