【摘 要】
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目的:探究环状RNA hsa＿circ＿0001785在不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织及癌旁组织中的表达情况并进一步探索其表达水平与乳腺浸润性导管癌分子亚型以及其他临床病理特征之间的相关性。方法:1、收集我院2019年3月到2021年3月病理诊断乳腺浸润性导管癌中进行外科手术切除的新鲜乳腺癌标本28例并同时留取距离肿瘤5cm癌旁组织作为对照。根据术后病理资料,参照2013 St.Gallen乳腺
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目的:探究环状RNA hsa＿circ＿0001785在不同分子亚型乳腺浸润性导管癌组织及癌旁组织中的表达情况并进一步探索其表达水平与乳腺浸润性导管癌分子亚型以及其他临床病理特征之间的相关性。方法:1、收集我院2019年3月到2021年3月病理诊断乳腺浸润性导管癌中进行外科手术切除的新鲜乳腺癌标本28例并同时留取距离肿瘤5cm癌旁组织作为对照。根据术后病理资料,参照2013 St.Gallen乳腺癌会议国际共识的分型标准将收集的病例分为4组:Luminal A型（13例）、Luminal B型（6例）、HER2过表达型（4例）以及三阴型（5例）。2、在数据库中调取hsa＿circ＿0001785的基因序列,依照环状RNA引物设计原则,利用primer5.0软件设计hsa＿circ＿0001785引物,正向CATGGGTCTGGGAAAATCGC,反向TCGACACTGTATTCCGAGGT。扩增区域覆盖成环位点成为背靠背反向引物。完成RNA的提取、逆转录以及PCR扩增,然后利用琼脂糖凝胶方法检测扩增产物特异性,二代测序验证基因序列同数据库中序列一致。3、采用qRT-PCR技术检测hsa＿circ＿0001785在肿瘤组织和癌旁组织中的表达水平,分析肿瘤组织和癌旁组织间的差异,进一步分析不同分子亚型乳腺浸润性导管癌中hsa＿circ＿0001785表达是否有差异,并分析其表达水平与临床病理特征（肿瘤直径,淋巴结转移、组织学分级、年龄等）之间的相关性。实验结果:1、二代测序检验,本实验设计引物特异性较好,扩增产物序列与基因库中序列一致。2、检测28例乳腺浸润性导管癌及癌旁组织中hsa＿circ＿0001785的表达水平,统计结果表明hsa＿circ＿0001785在23例癌组织中呈现低表达,在低表达的样本当中有17例的结果下调达到2倍以上,另外6例下调小于2倍;有5例乳腺浸润性导管癌组织中hsa＿circ＿0001785的表达水平是高于癌旁正常组织的,其中上调结果达到2倍以上的2例,另外3例上调小于2倍。统计结果显示hsa＿circ＿0001785在乳腺浸润性导管癌组织中下调（P<0.05）表达。3、Hsa＿circ＿0001785在不同分子亚型的乳腺浸润性导管癌之间表达没有明显统计学意义。4、Hsa＿circ＿0001785的表达水平与乳腺浸润性导管癌的组织分级（P<0.05）、淋巴结是否转移（P<0.05）具有统计学意义,与患者年龄（P>0.05）以及肿瘤大小（P>0.05）无明显统计学意义。结论:验证引物,正向CATGGGTCTGGGAAAATCGC,反向TCGACA-CTGTATTCCGAGGT为hsa＿circ＿0001785特异性引物。Hsa＿circ＿0001785在乳腺浸润性导管癌组织中下调表达,其表达水平与肿瘤的分级以及淋巴结转移呈负相关。Hsa＿circ＿0001785表达水平与乳腺浸润性导管癌患者年龄以及肿瘤大小无明显相关性,与乳腺浸润导管癌分子分型也无明显相关性。
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