组蛋白去乙酰化酶抑制剂调控甜菜春化作用机理的初步解析

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甜菜根系的膨大与糖分的积累主要发生在营养生长阶段。春化作为决定甜菜从营养生长阶段向生殖生长阶段转化的关键因素,与甜菜的生育周期和产量紧密相关。组蛋白去乙酰化酶(HDAC)参与的组蛋白乙酰化修饰作为重要的表观遗传调控方式之一,与冬性植物的春化作用具有一定的相关性。目前,组蛋白去乙酰化酶如何参与甜菜的春化还尚不清楚。为此本研究运用生物信息学的方法对甜菜HDAC家族进行分析。根据春化过程中HDAC表达模式挑选HDAC抑制剂(HDACi),观测其对不同春化处理后甜菜的农艺性状、基因表达量等多方面的影响。探究组蛋白去乙酰化修饰是否参与调控甜菜春化作用。主要研究结果如下1.本研究在甜菜中鉴定到16个HDACs家族成员,可分为RPD3/HDA1、SIR2、HD2三个亚家族。转录组测序表明春化过程中BvHDAC1、BvHDAC2、BvHDAC5、BvHDAC6基因表达水平均显著上调。SIR2亚家族成员中BvSIRT1在春化过程中也显著上调。HD2亚家族中BvHDT1和BvHDT2在春化6~10周后显著下调,暗示了这些基因可能参与甜菜春化时间剂量。结合春化相关BvHDACs所属亚家族挑选SIR2亚家族抑制剂烟酰胺、RPD3/HDA1亚家族抑制剂丁酸钠用作后续实验。2.分别对0周、4周及14周春化处理后的甜菜块根进行丁酸钠和烟酰胺处理,并对抽薹延迟(BD)、薹茎长度(TBL)以及抽薹率(BI)等农艺性状进行观测。结果表明,丁酸钠和烟酰胺不能诱导春化不充足的甜菜(春化0和4周)抽薹。春化14周甜菜中,丁酸钠处理抽薹发生所需时间明显长于对照组,抽薹率显著低于对照组,暗示RPD3/HDA1亚家族HDAC可能参与调控甜菜春化作用3.利用qRT-PCR检测HDACi处理后甜菜茎尖及幼叶抽薹相关基因的表达变化。结果显示,丁酸钠对春化14周甜菜茎尖处BvBTC1和BvFT2等春化途径基因表达具有抑制作用,同时也抑制幼叶中BvGI、BvELF3等光周期途径基因的表达。而在春化0周和4周时,丁酸钠处理会导致BvFT2、BvBTC1及BvGI上调表达,暗示丁酸钠的抑制作用依赖于充足的春化时间。烟酰胺同样能够抑制春化14周甜菜中BvBTC1、BvFLC、BvBBX19、BvGI、BvELF3基因的表达,这与丁酸钠的抑制作用相似。但是,烟酰胺不能抑制茎尖中BvFT2的表达,暗示丁酸钠抑制甜菜抽薹依赖于多个途径基因的共同抑制。
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