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目的(1)评价黄芪甲苷治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型大鼠的疗效;(2)探讨黄芪甲苷对NAFLD模型大鼠血清炎性因子以及肝组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(My D88)和核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响及可能机制。为黄芪甲苷在NAFLD防治中的临床应用提供理论依据。方法(1)雄性SD大鼠随机分为对照组10只和高脂饮食组53只。12周末处死3只高脂饮食大鼠,肝组织病理检查确认造模成功后将其余高脂饮食大鼠随机分为模型组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷中剂量组、黄芪甲苷高剂量组及多烯磷脂胆碱组,每组10只,分别以不同剂量黄芪甲苷或多烯磷脂酰胆碱灌胃。(2)16周末检测各组大鼠体质量和肝指数,观察肝组织病理;(3)检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平;(4)酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清空腹胰岛素水平(FINS)、总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)水平;(5)Western-blot法测定各组大鼠肝组织TLR4、MyD88和NF-κBp65蛋白表达水平;(6)RT-PCR法检测各组大鼠肝组织TLR4 m RNA、MyD88 m RNA和NF-κBp65m RNA表达水平。(7)统计学分析两组间比较应用t检验,各组间比较应用LSD-t。结果(1)黄芪甲苷各剂量组可以不同程度减低NAFLD模型大鼠体质量,其中黄芪甲苷高剂量组与模型组相比差异具有统计学意义(584.45±31.11 vs 533.67±28.27,P<0.01)。黄芪甲苷低剂量组、中剂量组和高剂量组均可改善NAFLD模型大鼠的肝指数,与模型组相比差异均具有统计学意义(4.28±0.32 vs 3.72±0.08,P<0.01;4.28±0.32 vs 3.69±0.18,P<0.01;4.28±0.32 vs 3.48±0.21,P<0.01)。(2)黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可以降低NAFLD模型大鼠血清ALT水平,与模型组相比差异具有统计学意义(115.22±24.65 vs 98.37±10.4,P<0.05;115.22±24.65 vs 92.00±17.63,P<0.01)。与模型组相比,黄芪甲苷低剂量组、中剂量组和高剂量组均可降低NAFLD模型大鼠血清AST水平,差异具有统计学意义(224.86±32.23 vs 198.14±30.05,P<0.01;224.86±32.23 vs 181.71±28.77,P<0.01;224.86±32.23 vs 170.62±16.30,P<0.01)。黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可以降低NAFLD模型大鼠血清TG水平,与模型组相比差异具有统计学意义(2.59±0.31 vs 2.33±0.41,P<0.05;2.59±0.31 vs 2.02±0.22,P<0.01)。黄芪甲苷各剂量组大鼠血清TC水平均有所降低,但与模型组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)与模型组相比,黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可以降低NAFLD模型大鼠FBG水平,差异具有统计学意义(18.21±1.55 vs 16.51±2.04,P<0.05;18.21±1.55 vs 15.71±1.78,P<0.01)。黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可以降低NAFLD模型大鼠FINS水平,差异具有统计学意义(7.35±0.87 vs 6.35±1.28,P<0.05;7.35±0.87 vs 5.40±0.77,P<0.01)。黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可以降低NAFLD模型大鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),与模型组相比差异具有统计学意义(5.97±1.06 vs 4.75±1.46,P<0.05;5.97±1.06 vs 3.81±0.88,P<0.01)。(4)与模型组相比,黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可以升高NAFLD模型大鼠血清T-AOC水平,差异具有统计学意义(7.99±0.60 vs 9.82±1.17,P<0.01;7.99±0.60 vs 10.78±1.43,P<0.01)。黄芪甲苷低剂量组、中剂量组和高剂量均可升高NAFLD模型大鼠血清GSH-PX水平,差异具有统计学意义(172.85±21.06 vs214.15±20.62,P<0.01;172.85±21.06 vs 251.35±22.56,P<0.01;172.85±21.06vs 297.05±27.48,P<0.01)。与模型组相比,黄芪甲苷中剂量组和高剂量可以降低NAFLD模型大鼠血清MDA水平,差异具有统计学意义(6.84±0.96 vs 6.30±0.78,P<0.05;6.84±0.96 vs 5.23±1.07,P<0.01)。黄芪甲苷高剂量组可以降低NAFLD模型大鼠血清SOD水平,与模型组相比差异具有统计学意义(170.63±28.14 vs 144.75±20.67,P<0.05)。(5)与模型组相比,黄芪甲苷低剂量组、中剂量组和高剂量组均可降低NAFLD模型大鼠肝组织NAS评分,差异具有统计学意义(7.3±0.68 vs 6.3±0.78,P<0.01;7.3±0.68 vs 5.1±1.37,P<0.01;7.3±0.68 vs 4.1±1.51,P<0.01)。(6)与模型组相比,黄芪甲苷低剂量组、中剂量组和高剂量组均可降低NAFLD模型大鼠血清TNF-α水平,差异具有统计学意义(4.23±1.25 vs 3.06±0.97,P<0.05;4.23±1.25 vs 2.81±0.70,P<0.01;4.23±1.25vs 2.10±0.34,P<0.01)。与模型组相比,黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可降低NAFLD模型大鼠血清IL-6水平,差异具有统计学意义(164.81±26.29 vs 131.76±22.35,P<0.01;164.81±26.29 vs 125.45±22.67,P<0.01)。黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可降低NAFLD模型大鼠血清IL-8水平,差异具有统计学意义(1.53±0.44 vs 1.10±0.17,P<0.05;1.53±0.44 vs 0.92±0.24,P<0.01)。与模型组相比,黄芪甲苷中剂量组和高剂量组可升高NAFLD模型大鼠血清IL-10水平,差异具有统计学意义(21.47±3.25vs 32.11±5.07,P<0.01;21.47±3.25 vs 38.96±8.71,P<0.01)。(7)与模型组相比,黄芪甲苷低剂量组、中剂量组和高剂量组均可显著降低NAFLD模型大鼠肝组织TLR4、My D88和NF-κBp65蛋白表达水平,差异具有统计学意义(P<0.01)。(8)与模型组相比,黄芪甲苷低剂量组、中剂量组和高剂量组均可显著降低NAFLD模型大鼠肝组织TLR4 m RNA、My D88 m RNA和NF-κBp65 m RNA表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论(1)黄芪甲苷能显著减少NAFLD模型大鼠的体重增长,降低血清ALT、AST和TG水平,改善胰岛素抵抗和氧化应激,降低大鼠肝指数,减轻肝组织脂肪变性和肝组织脂质沉积,对NAFLD有较好的治疗效果。(2)黄芪甲苷可能通过下调NAFLD模型大鼠肝组织的TLR4、MyD88及NF-κB表达,抑制IL-6、IL-8、TNF-α水平,升高IL-10水平,从而发挥对NAFLD的保护作用。