bFGF壳聚糖微球的制备及其促雪旺细胞分裂增殖的研究

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目的::研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)壳聚糖微球的制备方法及其对雪旺细胞的促分裂增殖作用。方法::以壳聚糖(Chitosan,CS)为载体材料,采用乳化交联法制备bFGF壳聚糖微球,并对微球的形态学、粒径分布、载药量、包封率和体外释药情况进行研究。分离培养雪旺细胞,传代后分为A、B组,将游离bFGF、bFGF壳聚糖微球分别加入不同组的雪旺细胞培养液中,分别检测雪旺细胞的数量、活力和细胞周期情况。结果:以乳化交联法制备的bFGF壳聚糖微球表面光滑圆整,分布均匀,无明显孔隙,分散性好;微球平均粒径为35.335um;载药量和包封率分别为7.57mg/g,95.14%;突释率18.082%;微球的体外释药过程较为稳定,25天累计释药率为82.04%。在促雪旺细胞分裂增殖试验中,培养1、2 d时,游离bFGF组的细胞计数、吸光度值和明显高于bFGF缓释微球组,差异具有统计学意义(p<0.005);培养3、4d时,游离bFGF组和bFGF壳聚糖微球组细胞计数、吸光度差异无统计学意义(p>0.005);培养6、8 d时,bFGF壳聚糖微球组的细胞计数、吸光度明显高于游离bFGF组,差异具有统计学意义(p<0.005)。流式细胞仪检测结果显示,培养2 d后,游离bFGF组的G2/M+S期百分数高于bFGF壳聚糖微球组,差异具有统计学意义(p<0.005);培养4、8d后,bFGF壳聚糖微球组的G2/M+S期百分数高于游离bFGF组,差异具有统计学意义(p<0.005)。结论:采用乳化交联法制备bFGF壳聚糖微球,操作简单,制备的微球球体表面光滑、分布均匀,分散性好,体外释药较稳定且释放率较高,能促雪旺细胞分裂增殖,并且保持了bFGF的生物活性。
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