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三色书虱Liposcelis tricolor Badonnel是在调查我国仓储书虱种类时,于山东菏泽发现的一个国内新记录种。该虫隶属于啮目Psocoptera、书虱科Liposcelididae、书虱属Liposcelis,严重危害储粮及面粉加工品,而且还可以传播真菌和细菌。Wolbachia是广泛存在于节肢动物体内的一类呈细胞质遗传的共生细菌,它可通过宿主卵的细胞质进行母系遗传,这类共生菌广泛存在于各种昆虫体内。Wolbachia参与了多种调控其宿主生殖活动的机制,包括诱导宿主的胞质不亲和(cytoplasmic incompatibility,CI)、诱导孤雌生殖(parthenogenesis-inducing,PI)、遗传雄性的雌性化(feminizing)、雄性致死(male-killing)等,同时Wolbachia与物种形成有关,并且在生物防治上有巨大的应用前景。本论文以三色书虱为对象,运用扫描电镜对其外部形态进行观察,为该虫的正确鉴定提供基础材料;同时通过分子生物学方法和透射电子显微镜对其体内的Wolbachia进行检测和观察,明确Wolbachia在三色书虱体内的感染情况,为进一步研究三色书虱与Wolbachia的共生关系以及更好地发挥Wolbachia在害虫生物防治中的作用提供理论基础。本研究得到了国家自然科学基金(30471173)等课题的支持,主要研究结果如下:通过扫描电镜,观察和描述了三色书虱的主要鉴定特征,具体描述为:体长约1.1mm,体色很不均匀,头部颜色最深,为黄棕色至褐色,合胸无色,腹部棕黄色,三种颜色相间,因此而得名三色书虱;头顶密布细毛,头部顶端由小型瘤突分界为鳞状结构,副室里有瘤突;小跟6个,下颚须上有8个感器,前胸背板侧叶突上SI毛较短,无PNS毛;合胸背板侧盾沟具有2-3根刚毛,前胸腹板具4-5根刚毛,合胸腹板具6-8根刚毛(呈弓形排列),还能看到后足腿节突起;腹部第1、2节具有规则的一排刚毛,其余各节刚毛不规则,3-4节有节间膜,腹部背板上有瘤突但个体小于头部,花纹与头部类似,腹端刚毛Mv9、Mv10与Md10可见,Se毛细长为圆筒型,具D毛,T型骨片基部膨大。三色书虱的各个特征与常见的嗜卷书虱相比,主要不同点在体色和体型上,这是最明显的区别特征。分子检测结果表明三色书虱体内有Wolbachia的共生,对扩增出的片段进行测序,得到一条605bp的核酸序列,将该序列在GenBank中通过BLAST比对,证实为Wolbachia wsp基因的核酸序列。通过系统发育分析,构建了不同宿主体内Wolbachia的系统发育树,该系统树的拓扑结构表明三色书虱体内的Wolbachia属于B亚群。利用透射电子显微镜对三色书虱胸部和腹部的切片进行观察,结果进一步证实三色书虱体内感染有Wolbachia。Wolbachia主要存在于三色书虱生殖器官部位的组织细胞内,卵黄体附近,位于细胞质中。同时,还观察到滤泡细胞(follicle cell),内有长约3μm的细胞核(follicular cell nucleus),核膜也比较清晰,在滤泡细胞的细胞质里有很多密集的内含物,包括线粒体(mitcochondda),附近还有空的液泡(empty vacuole)和大小不等的卵黄体(yolk globule)。同时,与线粒体混在一起的Wolbachia,外围有膜的包被,膜内的内含物呈球孢状,膜与内食物之间有一定的空隙,同时还观察到类似鞭形的Wolbachia。此外,还观察到Wolbachia一种类似于出芽生殖(budding)的现象,区别于二分裂(binary fission)的特征是,鞭形菌在其一端突出形成芽孢状,然后成为一个新的球孢型菌。形成的新球孢型子细胞与母细胞的形态大小有明显差异。