桃树根癌病是由根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)引起的、严重为害桃生产的一种细菌性病害。生物防治是目前防控根癌病最有效的方法。植物体内存在大量的具有防病、促生、固氮和生物修复等作用的内生细菌,他们可占据有利生态位、诱导植物产生系统抗性、拮抗植物病原菌。本研究的目的是从对根癌病具有不同抗性的桃树中分离鉴定内生细菌,并从中筛选拮抗根癌土壤杆菌的高效菌株,从而为桃根癌病的生物防治提供新的生防菌资源。首先,将根癌土壤杆菌接种到4种对根癌病具有不同抗性的桃树的枝条上;然后,于接种后不同时间点收集枝条,并采集根。对采集的桃枝条和根进行表面消毒、研磨后,通过涂布平板分离内生细菌。从抗病种质资源“红根甘肃桃”、根癌病获得抗性桃单株“西北13-1”、抗病潜力桃单株“中桃抗砧1号”、感病品种“阿克拉娃”中共分离到635株内生细菌,说明桃树中存在着丰富的内生细菌资源。分析这4种桃树的枝条和根内生细菌的菌落丰富度和种群数量,发现抗病性不同的桃树,其内生细菌的菌落丰富度和种群数量都存在明显差异。此外,还发现枝条内生细菌数量在接种病原菌A.tumefaciens后显著上升。这表明桃对根癌病的不同抗性或许与其内生细菌的菌群组成有关。采用平板拮抗法、生物测定从分离到的内生细菌中筛选拮抗根癌土壤杆菌的菌株。结果筛选出两株抑菌活性较高、具有生防潜力的拮抗菌株10DM4-1和10DI2-2。他们可显著抑制向日葵根癌瘤的形成,防效分别为86.08%和89.89%。生理生化测定和16S rDNA测序表明其分别为泛菌(Pantoea deleyi)和肠杆菌(Enterobacter cowanii)。由这两株拮抗菌可产生明显的抑菌圈可知,产生抗菌物质是其发挥拮抗作用的机制之一。为揭示他们具有的其他拮抗作用机制,对获得的两株拮抗菌进行了GFP标记,将标记菌株10DM4-1-gfp和10DI2-2-gfp灌根番茄后,应用激光扫描共聚焦显微镜和平板稀释法分析其在番茄根部的定殖情况。结果表明这两株拮抗菌可在根部细胞间隙定殖,并且其数量最后趋于稳定。这说明他们在番茄根组织内具有良好的生存和定殖能力,可能通过占据根部有利生态位拮抗根癌土壤杆菌。总之,本研究从桃树内生细菌中分离得到两株能够拮抗根癌土壤杆菌的拮抗菌10DM4-1和10DI2-2,他们或许可以被开发成用于防控根癌病的新的生防菌。因此,可以说本研究为利用内生细菌资源进行根癌病的生物防治提供了新的思路。此外,迄今为止未见泛菌属和肠杆菌属的生防菌防控根癌病的相关报道,本研究分离的泛菌10DM4-1和肠杆菌10DI2-2,为桃根癌病的生物防治提供了有价值的生防菌资源。