甲醛含量已成为当今居室、食品、纺织品中污染监测的一项重要安全指标。目前甲醛检测方法主要有分光光度法、电化学检测法、色谱法、电化学传感器法等。分光光度法受水浴或浓硫酸等操作条件的限制;电化学法对样品预处理要求较高;色谱法仪器比较昂贵,操作和维护比较繁琐,使用不方便;电化学传感器所受干扰物质多、寿命短。利用微生物传感器测定甲醛时,所筛选的菌种对甲醛的响应具有特异性,测定干扰较小,并且因其具有检测速度快,灵敏度高,重现性好等特点,在实现甲醛的快速、直观测定方面有良好的应用前景。课题选取枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、大肠杆菌为实验菌株制备固定化膜,以极谱型溶解氧电极作为换能器组成微生物传感器,研究了这3种菌株对甲醛的响应情况,实验得到枯草芽孢杆菌对甲醛响应最敏感。以枯草芽孢杆菌为固定化菌株,采用夹层法为固定化方法,对其固定化效果进行了研究。选择加入固定化载体为硅藻土,提高了固定化微生物膜的响应性能。并通过确定固定化载体的加入量和菌量,进一步优化了夹层法固定微生物的技术。通过实验找出枯草芽孢杆菌微生物传感器的最佳工作条件,进行传感器性能测试。结果表明,传感器工作的最佳温度为(33.5±0.5)℃,测试底液中磷酸盐缓冲溶液的最佳pH为6.76,底液中GGA的最佳浓度为18 mg·L-1。甲醛微生物传感器测定的标准曲线线性方程为y=13.534x-0.0177,线性相关系数为0.9966,相对甲醛浓度的线性响应范围为0.005～0.2 mg·mL-1。10次平行测定的相对标准偏差为1.13%,加标回收率为107%。干扰试验表明:苯酚、甲醇、乙醇对实验测定的干扰较小,当测定0.1 mg·mL-1甲醛时可共存苯酚450倍,甲醇600倍,乙醇2370倍。乙醛对测定有一定的干扰,当测定0.05 mg·mL-1甲醛时,可共存10倍以下的乙醛。实验得出固定化菌膜的保存时间超过60 d。为了验证枯草芽孢杆菌甲醛微生物传感器的性能,实验选取乙酰丙酮分光光度法与传感器法作对照实验。乙酰丙酮分光光度法测量波长为413 nm;沸水浴时间3 min;显色剂用量为2.00 mL;显色冷却5 min内进行测定。测得的线性回归方程为y=0.0211x-0.0093,相关系数为0.9996。同时利用课题组装的枯草芽孢杆菌微生物传感器和乙酰丙酮分光光度法测定未知浓度的甲醛。根据SPSS软件对两种方法的测定结果进行t检验,得到P>0.05,两者的差异不显著,说明乙酰丙酮分光光度法与微生物传感器的测定结果有很好的一致性。