新型高分子基因载体体系的制备和研究

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本研究的主要目的在于对转染效果较好的基因载体PEI-25K进行改性,制备出新型的高分子基因载体,并通过生物学评价的手段对改性后的不同载体进行比较;对筛选出的理想载体进行进一步的表征和研究。本试验首先用超支化聚乙烯亚胺(PEI)为大分子引发剂引发γ-苄基-L-谷氨酸-N-羧酸酐(BLG-NCA)开环聚合得到了一种新型的两亲性超支化多臂共聚物聚乙烯亚胺-聚谷氨酸苄酯(PEI-PBLG)。并通过胺解的方法对PEI-PBLG进行了进一步的改性,制备出聚乙烯亚胺-羟乙基谷酰胺(PEI-PHEG)。通过表面电位和粒径的检测、新型载体介导绿色荧光蛋白质粒(pEGFP-N1)对Hela细胞的转染实验、MTT实验、激光共聚焦实验,以及一系列的理化性能表征,实验证明;PEI-PBLG/DNA复合物的尺寸比PEI/DNA要小,这是由于在复合物形成时,疏水的PBLG链段的压缩作用造成的。PEI-PBLG侧羧基上的苄酯作为疏水基团,可以降低主体材料PEI的电荷密度,从而降低其毒性。而且在转染效率及其他性能方面与PEI-25K及胺解后产物PEI-PHEG相比,PEI-PBLG均有望成为基因转移的有效载体。其次,在筛选出较好的载体后,还可以引入透明质酸(HA)作为遮蔽体系,从而提高载体的稳定性能。
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