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目的:体外研究miR-34a在系统性红斑狼疮患者(systemic lupus erythematosus，SLE)的外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMCs)中的表达水平与CD4+FOXP3+ Treg细胞群体的相关关系。结合本室前期生物信息学的预测结果，在体外验证miR-34a对Foxp3的调控作用。 方法:首先收集SLE患者及健康志愿者外周血并分离PBMCs，QRT-PCR检测SLE患者及健康志愿者PBMCs中miR-34a的表达水平，应用流式细胞术检测PBMCs中CD4+FOXP3+ Treg群体的水平，同时采用CD4+CD62L na(i)ve T细胞诱导Th17细胞，QRT-PCR检测诱导的Th17细胞中miR-34a的表达水平。采用pcDNA3.1-mFoxp3-3-UTR质粒分别与pcDNA3.1-pre-miR-34a质粒或逆转录病毒载体MGP-34a共转染HEK293T细胞，通过Western blot检测转染后HEK293T细胞中Foxp3蛋白的表达水平验证miR-34a对Foxp3的表达调控;为进一步证实miR-34a对Foxp3的调控作用，将MGP-34a质粒与包装质粒共转染HEK293T细胞包装MGP-34a逆转录病毒，用逆转录病毒MGP-34a感染活化的脾细胞，同时构建miR-34a慢病毒表达载体pSMPUW-miR-34a。 结果:SLE患者PBMCs中Treg细胞百分比较健康志愿者低，而SLE患者PBMCs中miR-34a表达高于健康志愿者，但无统计学差异。诱导的Th17细胞中miR-34a表达水平高于经抗CD3和抗CD28活化的T细胞。Western blot检测pcDNA3.1-mFoxp3-3-UTR和pcDNA3.1-pre-miR-34a质粒或MGP-34a表达载体共转染后HEK293T细胞中Foxp3蛋白的表达，结果表明miR-34a能下调Foxp3的表达。进一步采用MGP-34a逆转录病毒感染脾细胞，经Western blot检测其中Foxp3蛋白的表达，结果发现MGP-34a逆转录病毒感染组中Foxp3蛋白表达水平较MGP逆转录病毒感染组低。最后将构建好的慢病毒载体质粒转染HEK293T细胞，RT-PCR检测miR-34a的表达，结果表明pSMPUW-miR-34a组miR-34a的表达远高于pSMPUW空载组。 结论:SLE患者PBMCs中Treg细胞群体的变化与miR-34a的表达变化呈负相关，在诱导的Th17细胞中miR-34a的表达升高。体外实验证明miR-34a下调小鼠Foxp3蛋白的表达，并成功构建了慢病毒载体质粒pSMPUW-miR-34a。