目的:本文主要研究HCMV UL144和UL145基因在低传代临床分离株中的多态性并检测它们mRNA的表达情况,为研究它们的多态性与先天性HCMV感染不同致病性之间的关系奠定基础,为揭示这两个基因编码产物的功能和先天性HCMV感染的致病机理提供更丰富的资料。 方法:从先天性感染HCMV的新生儿尿液中分离出HCMV病毒,接种至生长良好的人胚肺成纤维细胞中;收集感染病毒后出现病变的细胞;抽提病毒DNA,根据GeneBank公布的HCMV Toledo株UL144和UL145基因全序列及有关文献,从临床毒株DNA中扩增分离出UL144和UL145基因片段,并克隆入pMD18-T载体;对重组体进行测序鉴定;应用生物信息学方法分析它们的多态性;抽提病毒RNA,通过RT-PCR技术检测UL144和UL145基因mRNA的表达情况。 结果:从HCMV的低传代临床分离株PCR扩增出UL144和UL145基因全序列,克隆到pMD18-T载体并测序。不同临床分离株UL144基因与Toledo株进行同源性比较,结果核苷酸水平为98.5～99.2%,氨基酸水平为98.6～99.4%;UL145基因与Toledo株的核苷酸同源性为97.2～97.8%,氨基酸水平为97.8～98.5%。从HCMV临床分离株的细胞培养物中均能检测到UL144和UL145基因mRNA的表达。 结论:成功分离了4株HCMV临床分离株,并从中扩增了HCMV UL144和UL145基因并克隆,验证了UL144和UL145基因的多态性;并首次在体外培养人胚肺成纤维细胞中检测到UL145 mRNA的表达。