诱抗剂抑制向日葵列当的寄生及其诱抗机理的研究

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列当是一种全寄生性植物,对向日葵的生产造成了严重的影响。锦苗标靶是一种针对列当寄生的新型诱抗剂,本文筛选了锦苗标靶在室内培养皿滤纸体系条件下的最佳施用浓度及施用时期,并在盆栽条件下通过浇灌方式验证了其抑制列当寄生的效果;最后在田间条件结合滴灌研究了锦苗标靶对向日葵列当寄生的抑制效果,从而提出滴灌条件下施用锦苗标靶防控向日葵列当的最佳体系。最后,利用两个向日葵品种对锦苗标靶的诱抗机制进行了初步研究,得到了以下的结果:1.在培养皿滤纸体系条件下,在列当瘤结形成前进行根系浇灌,10d后瘤结数量的统计结果表明,1:500稀释液的抑制效果最好,每皿列当瘤结数的平均值仅为2.33个,相比清水对照的瘤结数量59.0个,降低了96.05%;而分别浇灌1:1000、1:2000、1:3000稀释液后每皿平均瘤结数相比对照呈现出随着稀释倍数增加抑制率降低的趋势;列当瘤结形成后根系浇灌的结果表明,对列当寄生抑制效果最好的为1:500稀释液,降低幅度为88.56%,其次为1:1000、1:2000、1:3000处理组,降低幅度分别为52.25%、47.14%和43.24%;列当出茎后根系浇灌对列当抑制效果仅在1:500处理组和对照呈现出差异,其他浓度处理和对照没有显著差异。上述处理后列当数量变化也通过列当褐变率的统计结果得到了证实,即不同浓度处理均可导致列当褐变率的增加,但以1:500处理效果最为明显。基于成本以及高浓度稀释液根系浇灌后出现新叶变褐枯死现象,建议选用1:2000稀释浓度在列当瘤结形成前进行处理最为经济和安全。2.基于以上研究结果,在温室条件下研究了锦苗标靶抑制向日葵列当寄生的效果。与清水对照相比,LD5009+锦苗标靶处理后列当的瘤结数减少了95.5个,列当瘤结的鲜重和干重分别降低了0.35g和0.08g;相应的向日葵株高和茎粗分别增加了2.09cm和0.52cm。而JK103+锦苗标靶处理后列当的瘤结数减少了37.5个,列当瘤结的鲜重和干重分别降低了0.33g和0.043g;向日葵的株高和茎粗分别增加了2.07cm和0.39cm。两个处理组和对照的差异均显著。3.在大田条件下结合滴灌施用锦苗标靶和生防菌剂(甲壳素枯草芽孢杆菌)抑制列当寄生的结果表明,锦苗标靶和锦苗标靶与甲壳素枯草芽孢杆菌混合滴灌后列当的寄生率相比清水对照分别降低了38%和27.34%;寄生程度也相应的降低了4.03和7.21;而单独施用甲壳素枯草芽孢杆菌复合物后,对列当的寄生数量几乎没有影响;相应的向日葵各项生长和产量指标在锦苗标靶和锦苗标靶与甲壳素枯草芽孢杆菌混合滴灌后均显著高于清水对照。4.在室内条件下利用JK103和LD5009初步研究了锦苗标靶抑制列当寄生的机制,结果表明在根系浇灌后,不论是JK103还是LD5009,H2O2含量在处理后24h达到最大值,分别为3.53μmol/g和2.68μmol/g;但是相比清水对照,LD5009增幅最大,为208.05%;在浇灌处理后,两个品种根系中的胼胝质的沉积量均有增加,但是以JK103在处理后48h增加的最为明显;四种不同的ROS清除酶(SOD、CAT、POD和PPO)的活性在处理后均呈现出先升高后下降的趋势,且均在处理后48h达到最大值,分别为69.77U/g、5.44U/g·min、1.88U/g·min和527U/g·min;抗性相关基因转录本检测结果表明,锦苗标靶处理后两个品种抗病基因的转录水平都不同程度的被诱导,但以LD5009+锦苗标靶样本的诱导程度最为明显,特别是CAT、Mn-SOD和XTH6基因,其转录水平相比对照上调了50倍之多。
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