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目的（1）通过观察不同程度心理应激刺激下雌性小鼠体重、旷场试验及糖水偏好试验,证实心理应激小鼠模型制备成功,促排卵收集卵母细胞,检测卵母细胞内活性氧（ROS）浓度、超氧化物歧化酶2（SOD2）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）m RNA水平,以研究不同程度心理应激对小鼠卵母细胞氧化应激水平的影响;（2）小鼠体内受精,收集受精卵进行体外培养,通过检测不同程度心理应激刺激后小鼠早期胚胎2细胞率、8细胞率、囊胚形成率、囊胚孵出率、囊胚分级,以及囊胚凋亡程度,以研究不同程度心理应激对小鼠早期胚胎发育的影响。基于心理应激与中医肝郁理论的紧密联系,为临床从肝郁-心理应激角度治疗女性生殖功能下降提供新思路。方法实验一心理应激对小鼠卵母细胞氧化应激水平的研究选取4～5周龄健康雌性未孕的ICR小鼠80只,随机分为4组,即正常组,心理应激强、中、弱刺激组,每组20只。正常组不给予任何干预,实验组按照心理应激模型制备方法,给予不同程度且不可预知性刺激,连续刺激6周。刺激前后分别记录各组小鼠的体重;刺激后各组小鼠在旷场中随机5分钟内小鼠的静止时间、运动时间、运动总距离、中央活动时间、外周活动时间的变化;以及刺激后各组小鼠的糖水偏好指数,以证实心理应激小鼠模型制备成功。造模成功后,对小鼠促排卵获取卵母细胞,采用化学荧光法测定小鼠卵母细胞内ROS浓度,应用实时逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法测定卵母细胞内SOD2、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶m RNA水平,以研究不同程度心理应激对小鼠卵母细胞氧化应激水平的影响。实验二心理应激对小鼠早期胚胎发育的研究根据实验一心理应激小鼠造模成功后,进行体内受精,次日晨检阴栓后收集并处理受精卵,显微镜下观察各组小鼠的受精卵数、2细胞胚胎数、8细胞胚胎数、囊胚数及形态评分,记录各组小鼠早期胚胎2细胞率、8细胞率、囊胚形成率、囊胚孵出率、囊胚分级,采用原位脱氧核苷酸末端转移酶介导的d UTP缺口末端标记法（TUNEL）测定各组小鼠囊胚的凋亡程度,以研究不同程度心理应激对小鼠早期胚胎发育的影响。结果所有实验数据均采用SPSS24.0统计软件进行分析。定量资料以均数±标准差（<sub>x±s）表示,方差齐时组间比较采用单因素方差分析（one-way anova）,组间两两比较采用LSD检验,方差不齐时组间比较采用Welch’s anova,组间两两比较采用Games-Howell检验。等级资料组间比较及组间两两比较采用Kruskal-Wallis H检验。P<0.05为差异有统计学意义。实验一1.刺激前后各组小鼠体重的比较刺激前,4组小鼠体重比较,差异无统计学意义（P>0.05）;刺激6周后,心理应激强、中、弱刺激组小鼠体重均低于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）;中、弱刺激组小鼠体重高于强刺激组,差异有统计学意义（P<0.05）。2.刺激6周后各组小鼠旷场试验结果的比较刺激6周后,心理应激强、中、弱刺激组小鼠的静止时间和外周活动时间均高于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）;中、弱刺激组小鼠的静止时间低于强刺激组,差异有统计学意义（P<0.05）;刺激6周后,心理应激强、中、弱刺激组小鼠的运动时间、中央活动时间和运动总距离均低于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）;中、弱刺激组小鼠的运动时间和运动总距离高于强刺激组,差异有统计学意义（P<0.05）;中刺激组小鼠的中央活动时间高于强刺激组,差异有统计学意义（P<0.05）。3.刺激6周后各组小鼠糖水偏好指数的比较刺激6周后,心理应激强、中、弱刺激组小鼠的糖水偏好指数均低于正常组,差异具有统计学意义（P<0.05）。4.各组小鼠卵母细胞内ROS浓度的比较心理应激强、中、弱刺激组小鼠卵母细胞内ROS浓度均高于正常组,差异具有统计学意义（P<0.05）;且随着刺激强度的增加,小鼠卵母细胞内ROS浓度升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。5.各组小鼠卵母细胞内SOD2、CAT、GSH-Px表达水平的比较心理应激强、中、弱刺激组小鼠卵母细胞内SOD2、CAT、GSH-Px表达水平均低于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）;且随着刺激强度的增加,小鼠卵母细胞内SOD2、CAT、GSH-Px表达水平降低,差异均有统计学意义（P<0.05）。实验二1.各组小鼠早期胚胎发育的比较4组小鼠的2细胞率、8细胞率和囊胚形成率比较,差异有统计学意义（P<0.05）。两两比较显示,心理应激强刺激组小鼠的2细胞率低于正常组,强、中刺激组小鼠的8细胞率、囊胚形成率均低于正常组,差异均有统计学意义（P<0.05）;中、弱刺激组小鼠的2细胞率、8细胞率、囊胚形成率均高于强刺激组,差异有统计学意义（P<0.05）;4组小鼠的囊胚孵出率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。2.各组小鼠囊胚分级结果的比较4组小鼠的囊胚分级比较,差异有统计学意义（P<0.05）。正常组、心理应激强、中刺激组小鼠的囊胚均以4级为主,弱刺激组小鼠的囊胚以2级和4级为主。两两比较显示,强、中刺激组小鼠的囊胚分级与正常组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。3.各组小鼠囊胚凋亡程度的比较心理应激强、中、弱刺激组小鼠的囊胚凋亡荧光强度均高于正常组,差异有统计学意义（P<0.05）;且随着刺激强度的增加,小鼠的囊胚凋亡荧光强度增强,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论1.心理应激导致小鼠卵母细胞内ROS水平升高,引发卵母细胞内氧化应激反应,损伤卵母细胞的抗氧化系统,降低卵母细胞内SOD2、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶的含量,从而损害卵母细胞功能。2.心理应激导致小鼠早期胚胎发育能力减退,降低小鼠早期胚胎2细胞率、8细胞率及囊胚形成率,影响各级囊胚占比,进而影响囊胚发育进程,并增强囊胚凋亡程度,从而使胚胎质量下降。3.心理应激造成卵母细胞氧化应激损伤,降低早期胚胎发育潜能,进而导致不孕症的发生,与中医“嫉妒不孕”学说存在共通性。通过此研究为临床从肝郁-心理应激角度治疗女性不孕症提供新的思路和方法,并为中医“情志致病”理论在现代医学模式下的推广应用提供科学依据。