【摘 要】
：
目的：1)研究氯通道在H2O2诱导PC12细胞凋亡中的作用；2)探讨氯通道在H2O2预处理适应性神经保护中作用及可能的作用机制。方法：1)流式细胞术检测凋亡；2)Hoechst核染色法观察细胞膜通透性；3)膜片钳技术记录全细胞电流；4)Scion Image图像分析软件测量并计算细胞体积；5)激光共聚焦免疫荧光技术、WesternBlot测定ClC-3氯通道蛋白含量。结果：1.H2O2（300μm
论文部分内容阅读
目的：1)研究氯通道在H2O2诱导PC12细胞凋亡中的作用；2)探讨氯通道在H2O2预处理适应性神经保护中作用及可能的作用机制。方法：1)流式细胞术检测凋亡；2)Hoechst核染色法观察细胞膜通透性；3)膜片钳技术记录全细胞电流；4)Scion Image图像分析软件测量并计算细胞体积；5)激光共聚焦免疫荧光技术、WesternBlot测定ClC-3氯通道蛋白含量。结果：1.H2O2（300μmol／L,24h）致（70.2±3.2）%细胞凋亡。低浓度H2O2（100μmol／L）预处理或加入氯通道阻断剂NPPB （100μmol／L）可抑制凋亡。2.H2O2可诱导凋亡性细胞容积减小（Apototic Volume Decrease, AVD）,呈时间和剂量依赖性。NPPB可抑制H2O2诱导的AVD。3. Hoechst33258染色示300μmol／L H2O2诱导凋亡1h后,大部分细胞出现细胞膜通透性增高（膜透化）,NPPB可阻断膜透化作用。4.给与H2O2（300μmol／L）后激活一逐渐增大的氯电流,NPPB能有效阻断该电流。5.预处理浓度的H2O2（100μmol／L）能激活55%细胞产生氯电流,其特性与300μmol／LH2O2所激活的有差异。6.47%低渗刺激预处理细胞诱发产生容积激活性氯电流,与对照组相比,其电流增大,对NPPB的敏感性增加。细胞肿胀程度降低,调节性容积回缩（RVD）增强,NPPB完全阻抑RVD。7.与对照组比较,预处理后的细胞CLC-3氯通道蛋白表达增加。结论：1)氯通道可能通过AVD和膜透化而参与H2O2诱导PC12细胞凋亡；2)ClC-3氯通道的表达和功能增强可能是H2O2预处理所诱导的神经保护的机制之-；3)氯通道在预处理过程中可能通过增强细胞容积调节能力而起到神经保护作用。
其他文献
目的:1.利用Gateway技术构建各型FGFR2Ⅲc慢病毒表达系统;2.以此为基础初探FGFR2Ⅲc野生型及突变型对骨肉瘤细胞Saos-2、成肌细胞L6增殖和分化的影响。方法:1.通过RT-PCR获得FGFR2Ⅲc-WT基因,采用重叠延伸法进行S252W、S252W+P253R的突变,将上述获得的各基因克隆至慢病毒入门载体pENTA-11,利用LR重组酶,pENRY-FGFR2Ⅲc野生型及突变型
利用纤维素酶水解纤维素生产燃料乙醇是一种有前景的技术,但是该技术需要内切葡聚糖酶、纤维二糖水解酶和β-葡萄糖苷酶协同作用,才能起到较好的水解效果。然而产纤维素酶活性较高的微生物β-葡萄糖苷酶活性低,含量少,成为纤维素酶降解纤维素的瓶颈。本研究将来源于绿色木霉（Trichoderma viride）AS3.3711、黑曲霉（Aspergillus niger）CICC 40179、斜卧青霉（Peni
环境耗散对于量子系统的影响是凝聚态物理研究的一个重要问题,近年来宏观量子效应的研究更加凸现这一问题的重要性,而在量子信息方面,环境耗散对量子系统的退相干机制是一个重要的基本问题。量子耗散系统中最基本的模型就是自旋—玻色子模型（spin-boson model）,也称耗散两能级系统（dissipatie two-level-system）,这个系统的一个重要问题就是声子导致的局域化（phonon-i
为了掌握微藻的异质性特征与群体生产潜力的关系及规律,以布朗葡萄藻764株和765株（Botryococcus braunii）为研究对象,采用批次培养的方法,分别设置6种光照强度、2种光照强度和7个氮磷营养水平、2种光照强度和培养基浓度下7个株间接种比例以及B.braunii藻滤液浓度等处理下的生长4部分实验。研究了光照强度、氮磷营养水平、株间接种比例和异株藻滤液浓度等因子对B.braunii生长
侧线系统是水生动物重要的感觉器官,为鱼类和水生两栖类所特有,而对于我国Ⅱ级重点保护水生野生动物唐鱼（Tanichthys albonubes）侧线系统的研究至今甚少。通过荧光染色和扫描电镜的方法观察唐鱼后部侧线系统（posterior lateral line system）的发育,发现唐鱼初级后部侧线系统发育开始的时间（24 hours post fertilization）早于斑马鱼（55 h
目的：近年来的研究表明,酪蛋白激酶Ⅰα（Casein Kinase 1 alpha, CKlα）与肿瘤的发生发展关系密切。通过RNA干扰技术特异沉默CK1α基因,体外研究其对A549细胞生长增殖的影响,为进一步研究CK1α基因在肺癌中的作用提供参考。方法：构建三个针对CK1α基因不同位点的短发夹表达载体及一个无义错配载体,分别转染A549细胞,并用G418筛选出阳性克隆,通过RT-PCR和West
从Leggett计划提出后,量子相干隧穿在理论和实验研究中一直是人们感兴趣的话题。而量子相干隧穿研究中一个重要问题是耗散环境的影响,这方面最有名的模型就是所谓的耗散两能级系统（the dissipative two-state-system）,也称自旋-玻色子模型（the spin-boson model）。本文使用小极化子理论研究了处于超欧姆环境浴下的耗散两能级系统中的相干—非相干转变（the
随机场是一个参数为欧氏空间的的随机变量族.在构建像环境场空间的现象模型时,比如水文学,地理学,海洋学,医学图像等,随机场是一个很有用的工具.作为随机场的经典例子,分形布朗运动具有平稳增量,同时具有自相似性.更进一步的认识是,分形布朗运动还具有迷向性,也就是说随机场在一个合适的参数空间变换下是不变的.但是在许多应用中,比如裂缝岩石模型,随机场却大多数具有非迷向性,也就是说在不同的方向上具有不同的几何
盔形溞主要分布在温带及其邻近地区,为了了解不同地理种群盔形溞的遗传多样性,本文以位于亚热带的云南高海拔地区的拉市海、洱海、程海和位于南亚热北部的广州流溪河水库4个盔形溞种群为研究对象,采用RAPD标记进行研究。通过对盔形溞RAPD反应,对20条引物进行筛选试验,从中筛选出扩增多态性片段较多且扩增产物稳定的RAPD引物12条。在此基础上,对4个种群的180个盔形溞样品的基因组DNA进行扩增,共检测到
本文首先对中子星的结构与各种性质行了大致的介绍,然后概述了中子星研究的历史,指出了各种研究模型及其特点。对中子星的研究,最重要的输入量是物态方程。不同的物态方程将会导致数值模拟结果的不同。目前主要的研究方法是以相对论平均场（RMF）理论为基础,引入不同的相互作用模型,用已知的核物理知识摸拟处于高密度、强磁场条件下的中子星物质。我们的研究先是根据已有的物态方程,结合描述静止星体结构的相对论方程（TO