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中药金莲花为毛茛科植物金莲花(Trollius chinensis Bunge)的干燥花,具有清热解毒,滋阴降火和消炎杀菌的作用,其所含化学成分主要有黄酮类化合物、生物碱、有机酸、挥发油等,其中黄酮类化合物为金莲花的主要药效成分。本实验主要利用液质联用技术对其黄酮类化合物进行定性分析,并通过同时测定3种黄酮类化合物,对金莲花药材及其胶囊进行质量评价。
第一部分、金莲花中黄酮类成分的HPLC-ESI-MS/MS定性研究
目的:建立金莲花中黄酮类成分的HPLC-MS/MS定性分析方法。
方法:色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱;流动相为甲醇-0.01%甲酸,梯度洗脱。采用Q-trap串联质谱仪,ESI源,负离子检测,MRM-IDA-EPI扫描和Precursor-IDA-EPI扫描。根据2”-O-β-L-荭草苷半乳糖苷OGA,荭草苷和牡荆苷的ESI-MSn的裂解行为,对金莲花提取液中的成分进行结构分析。
结果:推测出金莲花中18种黄酮类成分。
结论:本法为金莲花药材的质量评价提供了新的手段,并对科学阐释金莲花药效物质基础具有重要意义。
第二部分、HPLC-DAD/MS法同时测定金莲花与金莲花胶囊中3种成分
目的:建立金莲花及其胶囊中荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草苷和牡荆苷3种成分同时测定的方法。
方法:采用HPLC-DAD结合HPLC-MS的方法。色谱柱为C18柱,以0.04%磷酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长350nm;根据3种成分的ESI-MS/MS裂解行为,采用HPLC-MS对其进行了结构鉴定。
结果:3种成分的峰面积与浓度线性关系良好(r>0.9995);平均回收率为99.0%~100.9%;日内、日间精密度分别为0.060%~0.84%和0.37%~1.4%。对11批金莲花药材和8批金莲花胶囊进行了分析。
结论:该方法专属性、精密度和准确度良好,可用于金莲花药材及其胶囊的质量控制。