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随着畜禽养殖业的迅速发展,禽畜粪便污染已成为一个不容忽视的问题,粪便无害化处理是发展的必然趋势。在绿色农业已成为世界农业发展方向的今天,大力提倡和使用微生物菌剂,走可持续发展的道路是我国农业发展的必然趋势和选择。新型微生物发酵床养殖技术可以有效地解决畜禽生产中的粪便处理和环境污染问题,其环保性和经济性明显优于集约化、规模化养殖方式。本研究从猪场以及污水中采集土样,采用富集加热、稀释涂布进行芽孢杆菌的分离,共分离出35株产芽孢的菌株。对筛选出的产芽孢菌株分别进行除臭能力、氨氮利用及大分子物质降解能力的测定,从而筛选出除臭效果较优的Z-22菌株,对氨气去除率达到29.2%,硫化氢去除率达到52%,G-4菌株氨氮去除率达到70%以上、并且大分子物质降解能力较高。通过对菌株进行形态特征观察、生理生化试验及16S rDNA的序列比对分析,最终鉴定Z-22菌株为Bacillus amyloliquefaciens,G-4菌株为Bacillus velezensis。芽孢是微生物菌剂的最佳制剂形式,对恶劣的环境因素具有很强的抗性。为进一步提高菌株的芽孢形成率以及芽孢数量,通过单因素试验和正交试验对Bacillus amyloliquefaciens Z-22菌株和Bacillus velezensis G-4菌株产芽孢条件进行优化。Bacillus amyloliquefaciens Z-22菌株最佳产芽孢条件:玉米粉0.5%、黄豆饼粉2%、FeSO4·5H2O 0.3%、MgSO4·7H2O 0.05%,培养基初始pH 7.5、种龄20 h、装量30 mL/250 mL、发酵48 h。在此优化条件下,Z-22菌株发酵液中的芽孢数量为2.1×109 cfu/mL,芽孢形成率达到97.16%。Bacillus velezensis G-4菌株最佳产芽孢条件:玉米粉0.5%、黄豆饼粉2%、MnSO4·H2O 0.3%、MgSO4·7H2O 0.05%,培养基初始pH 7.5、种龄18 h、装量50 mL/250 mL、发酵48 h。此优化条件下,G-4菌株发酵液中的芽孢数量为1.9×109 cfu/mL,芽孢形成率达到94%。通过优化大大缩短了发酵时间,提高了芽孢形成率,为两株功能菌株的中试生产提供了依据。将G-4、Z-22、N-8菌株按照不同的比例混合组成复合菌剂。分别测定复合菌剂处理猪粪过程中的氨氮利用、除臭及大分子物质降解的能力,从而确定最佳的菌剂组成形式:G-4种子液(3%接种量)、Z-22种子液(3%接种量)和N-8种子液(3%接种量),该复合菌剂氨气去除率达到33.78%,硫化氢去除率达到56.64%,复合菌剂在除臭方面优于单株菌株。其氨氮去除率也达到了70%以上。该复合菌剂为微生态发酵床养殖及粪便堆肥提供了微生物菌种资源。