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本实验室分离筛选出的微嗜酸寡养单胞菌（ Stenotrophomonas acidaminiphila）G1能够降解毒死蜱（CP）、甲基对硫磷（MP）、辛硫磷、二嗪磷、三唑磷（TAP）、丙溴磷。本文将编码甲基对硫磷水解酶（MPH）的mpd基因，克隆到大肠杆菌上并成功表达，然后研究了温度、pH、有机溶剂甲醇等对MPH活性的影响，比较G1菌粗酶液与构建的大肠杆菌工程菌粗酶液对CP、MP、TAP的降解效果。 从G1菌中克隆长度为996 bp的mpd基因，构建重组质粒，将该质粒转化到大肠杆菌，获得基因工程菌株，成功表达重组蛋白，重组后的 mpd基因编码的甲基对硫磷水解酶（MPH），经IPTG诱导表达后蛋白约30 KDa，检测其酶活，重组后的蛋白能降解MP。 在研究温度对MPH活性影响的时候，研究发现当温度为47℃时，底物MP的降解率最高，说明MPH最适反应温度为47℃。在pH对MP H活性影响的实验中，在碱性条件下，底物MP的降解率均高于在中性条件下，这说明MPH在碱性条件中的活性高，通过实验发现，MPH的最适反应pH为9.1。在研究有机溶剂甲醇对MPH的活性影响实验时，实验结果显示，当添加的甲醇在整个体系的体积比为6％～50%之间时，这可以提高MPH的活性，因为底物MP的降解率明显要高于不加任何甲醇的对照，当添加的甲醇体积比超过50%后，MPH的活性被抑制，底物MP的降解很少，降解率小于不添加甲醇的对照组的降解率。实验结果发现MP的降解产物PNP对MPH的活性没有影响。 在G1菌粗酶液与大肠杆菌工程菌粗酶液对两种农药的降解实验中，工程菌粗酶液对C P、TAP的降解率明显高于G1菌粗酶液，这是因为构建的工程菌大肠杆菌能够大量表达MPH。在添加相同的总蛋白量时，G1菌粗酶液对CP的降解率高于对TAP的降解率。将G1菌粗酶液对MP的降解与G1菌对MP的降解结果比较，能够发现 G1菌在经过16代传代后，活力明显下降，克隆的大肠杆菌因其能够大量表达甲基对硫磷水解酶蛋白，所以其对MP的降解率高。在降解实验中，当添加的工程菌总蛋白量相同时，TAP的降解率反而大于MP的降解率，这是因为MP的另一降解产物O,O-二甲基硫代磷酸对MPH有抑制作用。