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目的通过检测Sema4C在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达情况,分析其表达与卵巢上皮性癌临床病理因素之间的关系及其与卵巢上皮性癌预后的关系,探讨Sema4C在卵巢上皮性癌发生、发展中的作用及在卵巢癌诊断、预后中的价值;并进一步研究Sema4C在人上皮性卵巢癌细胞中的表达,为进一步探讨Sema4C参与卵巢肿瘤生物学行为的具体机制奠定基础。方法组织:通过SYBR Green I嵌合荧光实时定量PCR技术检测Sema4C mRNA在74例卵巢上皮性癌、15例卵巢上皮性交界性肿瘤、15例卵巢上皮性良性肿瘤及15例正常卵巢组织中的定性,定量表达,结合卵巢上皮性癌的临床病理特征进行分析。应用组织芯片免疫组织化学方法检测111例卵巢上皮性癌、30例卵巢上皮性交界性肿瘤、30例卵巢良性肿瘤及30例正常卵巢组织中Sema4C的蛋白表达和定位特点,并分析其表达情况与卵巢癌临床病理参数及预后的关系。细胞:选择人上皮性卵巢癌细胞及人成纤维细胞,应用SYBR Green I嵌合荧光实时定量PCR及细胞免疫组化技术进一步检测Sema4C基因及蛋白的表达。结果1.Sema4C mRNA在不同卵巢组织中的表达及与卵巢上皮性癌临床病理参数的关系:在卵巢上皮性癌组的表达明显高于正常卵巢组、良性及交界性肿瘤组的表达,差异有统计学意义(P<0.05);交界恶性组与良性组、正常组的表达未发现显著性差异(P>0.05)。在卵巢上皮性癌的临床病理参数(发病年龄、病理类型、病理组织学分级、FIGO分期、有无腹水)中,Sema4C mRNA表达水平与组织分化程度(P<0.05)、FIGO分期(P<0.05)有关,即组织分化越差,FIGO期别越晚,mRNA表达水平越高;Sema4C的表达水平与发病年龄、病理类型、有无腹水无关(P>0.05)。2.Sema4C蛋白在不同卵巢组织中的表达及与卵巢上皮性癌临床病理参数的关系:免疫组化显示Sema4C主要定位于细胞浆和(或)细胞膜。卵巢癌组织细胞内可见棕黄色深染颗粒。Sema4C蛋白在卵巢上皮性癌组的表达高于交界性、良性及正常卵巢组(P<0.05);其它三组之间比较未发现显著性差异(P>0.05)。临床期别晚组及组织分化低组Sema4C蛋白阳性表达率较临床期别早及组织分化高组高,差异有显著性(P<0.05)。Sema4C蛋白的阳性表达与发病年龄、组织学类型、有无腹水无显著差别(P>0.05)3.Sema4C蛋白表达与卵巢上皮性癌预后的关系:对有完整随访资料的75例卵巢上皮性癌患者进行随访,随访时间截至2008年12月。75例随访病例中,存活5年者19例,累计生存率为25.33%,中位生存时间为27个月。47例Sema4C蛋白表达阳性患者存活5年者8例,累计生存率为17.02%,中位生存期19个月;28例Sema4C蛋白表达阴性患者存活5年11例,累计生存率为39.29%,中位生存时间为31个月。Sema4C蛋白表达阳性组5年累计生存率低于阴性组(17.02%&39.29%),中位生存时间短于阴性组(19个月&31个月),经Log-Rank检验,两组间有显著性差异(P=0.014)。对年龄、组织类型、临床分期、病理分级、腹水、Sema4C蛋白等6个因素进行Cox模型单因素和多因素分析,结果示:除临床分期外,其余因素均不是影响卵巢癌预后的独立危险因素。4.从细胞水平研究Sema4C在人卵巢癌细胞及正常人成纤维细胞中的表达情况:发现Sema4CmRNA在人卵巢癌细胞中的表达水平明显高于正常人成纤维细胞。Sema4C蛋白在正常人成纤维细胞对照组中几乎不表达,而在人卵巢癌细胞浆及细胞膜中,可见阳性表达。结论1.Sema4C mRNA及蛋白在卵巢上皮性癌中的表达显著高于正常卵巢组、良性及交界性肿瘤组的表达,且均与卵巢癌病理分级、临床分期有关,提示Sema4C的高表达与卵巢上皮性癌的发生、发展及恶性生物学行为密切相关,其表达水平可用于卵巢上皮性癌的辅助诊断,Sema4C基因可能成为卵巢上皮性癌基因治疗的新靶点。2.Sema4C蛋白表达与卵巢癌患者的生存率呈负相关,可作为判断患者预后的参考指标。3.从细胞水平上检测Sema4C基因、蛋白在卵巢癌细胞中的表达,确定了Sema4C与人卵巢癌细胞恶性生物学行为有相关性。