补肾活血汤对胫骨平台骨折愈合影响的临床及实验研究

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:caojun3538073
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目的:通过测获临床指标衡量补肾活血汤治疗胫骨平台骨折患者的临床疗效,为其推广应用打下基础;选取大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs),研究补肾活血汤促进大鼠BMSCs迁移的活性部位、最佳药物浓度以及其可能的机制,初步探究补肾活血汤治疗骨折的药物靶点,为中医药促进骨折愈合提供理论依据及创新思路。方法:临床观察:选取广州中医药大学第三附属医院(附属骨伤科医院)住院部肾虚血瘀型胫骨平台骨折(需手术治疗)患者36例,简单随机分为术后口服补肾活血汤的治疗组与不服用中药的对照组,余常规治疗相同。通过患者术前及术后3周的视觉模拟评分法(Visual Analog Scale, VAS)疼痛评分、骨折临床愈合时间及骨折临床愈合后膝关节功能评分来评价疗效。实验研究:对大鼠BMSCs进行体外分离、培养、分化及鉴定,取第三代(P3)细胞进行后续实验。索氏提取法提取补肾活血汤石油醚、无水乙醇、乙酸乙酯及水部位,Transwell实验检测其对大鼠BMSCs体外迁移能力的影响;Western blot蛋白质印迹法)及细胞免疫荧光检测补肾活血汤对人胰岛素样生长因子2受体(Human Insulin Like Growth Factor 2 Recetor, IGF2R)蛋白表达的影响。成果:临床观察:在疼痛评分方面,两组组内治疗前与治疗后对比都具有统计学意义,但两组之间的差异无统计学意义;除此之外,另外两项指标均显示治疗组较对照组有明显优势。实验研究:Transwell结果显示,除乙酸乙酯部位10ng/mL、50μg/mL外, 其余均较对照组有差异,且差异具统计学意义;活性最高为石油醚部位100μg/mL组;在同一部位(如乙酸乙酯)的不同浓度间(如10μg/mL与50μg/mL)也存在活性差异。从免疫荧光图片中可读取到相似结果。采用Western blot及细胞免疫荧光检测IGF2R蛋白的表达,与对照组相比,差异具有统计学意义。结论:补肾活血汤具有促进胫骨平台骨折愈合、提高患者临床综合疗效等作用,加上作为价格低廉、副作用少的中医药治疗方法,其在临床的应用值得推广;补肾活血汤石油醚、无水乙醇、乙醇乙酯和水提取物在特定浓度下均可成为活性部位,可诱导BMSCs定向迁移,活性程度与药物浓度相关;其分子机制可能与提高BMSCs表面相关受体IGF2R的表达相关,但相关机制探究还需进一步深入。
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