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目的:分离、纯化并鉴定人初乳样本中具备蛋白水解能力的菌株,进一步确定产酶菌株胶原酶的编码基因以及分子结构特性,最终利用大肠杆菌原核表达系统进行原核表达,并对表达的重组酶进行纯化以及酶学性质研究。方法:以牛奶平板培养法分离并纯化产酶菌株,利用16Sr DNA序列分析以及API CH50培养基分析菌株的遗传特性与生化特性,最终鉴定产酶菌株所属类型。其次,利用串联质谱技术分析产酶菌株所产酶的类型,再结合质谱分析结果以菌株基因组DNA为模板采用PCR法获得胶原酶colR75E基因,构建pET28a/colR