奶牛乳腺炎是影响奶牛产业健康发展的重要疾病。由于溶菌酶几乎对所有革兰氏阳性菌及部分阴性菌具有显著的抑菌活性，使得培育转溶菌酶基因新品系奶牛成为目前有效预防奶牛乳腺炎的新途径。转溶菌酶基因奶牛虽然对奶牛乳腺炎具有一定的抵抗作用，但其乳腺中高效表达的溶菌酶通过乳汁对犊牛甚至人类消化道内菌群结构的影响却鲜有研究报道。本研究通过平板扩散法及梯度稀释法检测了重组人溶菌酶（recombinanthuman lysozyme, rhLYZ）的体外抑菌活性，并利用变性梯度凝胶电泳（denaturinggradient gel electrophoresis, DGGE）技术对口服一定剂量重组人溶菌酶后的小白鼠肠道菌群结构多样性和动态变化进行了检测。1.以购买商品化的溶菌酶标准品作为对照，通过平板扩散法检测rhLYZ在体外对致病菌及益生菌的抑菌作用，同时用梯度稀释法检测重组人溶菌酶的MIC和MBC。分别将重组酶和商品酶做梯度稀释后，滴加到涂布有一定量菌液的MH平板，通过平板扩散法测量各组抑菌环直径大小，从而判定其抑菌活性。结果表明，重组人溶菌酶抑菌活性显著高于标准溶菌酶，低质量浓度的重组酶即可对致病菌的生长产生抑制和杀灭作用。rhLYZ对金黄色葡萄球菌（Staphylococcus Aureus），致病性大肠埃希菌（Escherichiacoli）较为敏感，抑菌环达到15mm~18mm，对多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida）抑菌环则达到27.5mm。提示rhLYZ对金黄色葡萄球菌、致病性大肠埃希菌及多杀性巴氏杆菌等病原菌均具有较强抑菌活性。rhLYZ对益生菌的生长抑制作用有选择性。2.利用基于16s rDNA的PCR-DGGE技术结合特异性和共性条带割胶回收DNA进行克隆和测序，监测了口服不同剂量rhLYZ后小鼠在不同时间内粪样细菌区系以及菌群结构多样性的变化，并鉴定了部分特异性和共性菌种成员，分析rhLYZ对小鼠肠道微生物群落结构和多样性的影响。结果表明，小鼠在口服接种rhLYZ后，与对照组相比，除1.0mg/mL剂量组小鼠粪样微生物多样性明显减少外（P<0.01），0.5mg/mL剂量组、0.25mg/mL剂量组及0.10mg/mL剂量组差异不显著（P>0.05）；UPGAMA聚类分析结果显示，1.0mg/mL剂量组与对照组相菌群结构似性最低（31.9%），0.5mg/mL剂量组、0.25mg/mL剂量组、0.10mg/mL剂量组与对照组菌群结构相似性均在40%左右。表明口服rhLYZ对小鼠肠道菌群结构有一定影响，且与剂量相关。与对照组相比，各接种剂量组小鼠肠道中优势菌种均保持不变，主要有拟杆菌（Bacteroides sp.）、马胃葡萄球菌（Staphylococcus equorum）、缓慢葡萄球菌（Staphylococcus lentus）等葡萄球菌属，约氏乳杆菌（Lactobacillus johnsonii）、罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri strain）等乳酸菌属。