口腔粘膜与阴茎阴囊区皮瓣对合组建尿道一期修复尿道下裂体外构建人体口腔粘膜的初步研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangxiuli2010
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尿道下裂是泌尿生殖系统常见的先天畸形,在我国发病率约为3‰,手术是唯一的治疗手段。尿道下裂修复手术难度大、并发症高,从19世纪初至今,有文献报道的手术方法达250种之多,随着整形外科原则和显微外科操作技术在尿道下裂修复术中的应用,手术治疗水平明显提高,但是修复效果仍不很满意,手术方法仍在不断改进。 从1997年我们开始采用口腔粘膜游离移植修复阴茎阴囊区组织缺乏的尿道下裂,口腔粘膜柔韧、移植后易于成活、采取方便、重建尿道形态好,优于皮片、膀胱粘膜重建尿道,但是在应用过程中发现口腔粘膜组织量有限,过多采取会影响张口功能,不适于较长段尿道缺损的修复,而且为了防止吻合口狭窄需要二期手术。鉴于口腔粘膜再造尿道的优点和以往应用阴囊纵隔岛状皮瓣修复尿道下裂的成功经验,李森恺教授应用创新学上的组合原理,首次提出了口腔粘膜与阴囊纵隔岛状皮瓣对合组建尿道的观念,以后又将皮瓣的应用范围扩大到阴茎腹侧皮瓣和包皮内板岛状皮瓣,为修复尿道下裂提供了一条全新的思路。与以往采用一种组织材料重建尿道相比,该方法在一定程度上解决了尿道下裂修复中组织材料不足的问题,提高了手术成功率和减少了术后并发症。对合方法切取的皮瓣组织量较小,减少了对阴茎阴囊形态的影响,口腔粘膜构建尿道外口的大部分,形成的尿道外口接近于正常尿道外口形态,皮瓣翻转与口腔粘膜对合避免了皮瓣卷成管状尿道对蒂部的折叠、压迫,保证了皮瓣远端的血运、皮瓣转移更加灵活,口腔粘膜移植于结构致密、有丰富血运的阴茎海绵体白膜上,粘膜不易挛缩、更易成活。经过初步临床观察,该方法获得了较好的治疗效果,但是该手术临床应用时间尚短,仍需要进一步观察,得出更为确切的结论。 细胞培养技术和组织工程技术的发展,使培养的粘膜组织用于重建尿道成为可能,口腔粘膜与阴茎阴囊区皮瓣对合组建尿道,仍然需要采取一定量的口腔粘膜,相应增加了手术风险和手术创伤,我们设想在术前采取尿道下裂患者少量的口腔粘膜,在体外培养,形成一定面积的粘膜片,用于部分尿道的重建。经过实验,人体口腔粘膜上皮细胞体外培养获得成功,培养的细胞为单一上皮类细胞,生长中无成纤维细胞混杂,细胞可传9—10代,生长期50—60天,4代前细胞形态、大小均一,4代后细胞出现一定程度的形态差异,但细胞增值力无明显减弱,8代后部分细胞增殖能力下降,并出现一定程度的变异,继续传代,细胞呈片状脱落、凋亡。体外培养的口腔粘膜上皮细胞呈类圆形、大小均一、胞浆丰富、胞核大,长满后细胞密集排列为多角形,呈现上皮类细胞特有的铺路石样外观;透射电镜下可见上皮类细胞间特有的桥粒连接;应用广谱角蛋白单克隆抗体免疫组化染色方法,可见细胞胞浆内角蛋白颗粒;第3代细胞经流式细胞仪检查无核型改变及多倍体出现,以上证明了培养的细胞为正常的口腔粘膜上皮细胞,3代以内细胞结构、形态正常,可用于组织工程口腔粘膜构建。
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