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干巴菌(Thelephora ganbajun Zang)在分类学上隶属革菌属(Thelephora),是云南省特有的一种外生菌根真菌。松乳菇(Lactarius deliciosus)是乳菇属(Lactarius)的一种外生菌根真菌。两者均可与云南松共生,但干巴菌的分布范围更狭窄,所以对其的研究较少。松乳菇与干巴菌生长环境类似且有关研究较多,对干巴菌的研究具有参考价值。由于至今没有成熟的人工技术可以控制子实体的产生,与市面上熟知的腐生食用菌,例如灵芝(Ganoderma lucidum)、金针菇(Flammulina velutipes)、木耳(Auricularia auricular)等完全不同,不能人工条件下依靠精确的温度、湿度、营养条件进行全年生产,只能完全依赖野生采集。特别是干巴菌在自然条件下发生率比其他菌根真菌低,所以产量更低。由于从菌根组织或子实体中分离菌根真菌困难重重,且很多菌根真菌在人工培养基上生长缓慢或无法生长,因此可食用菌根菌的菌种分离鉴定、优化培养是目前该研究领域比较紧迫的任务。本研究的目的是通过优化分离方法,获得干巴菌、松乳菇纯培养菌丝体;通过单因子试验和正交试验探究分离自云南省玉溪市及昆明市小哨乡的干巴菌分离物的最适营养条件及pH值,通过对比有关文献中松乳菇培养基的优化结果,得到松乳菇分离物的适宜培养条件,尽量缩短培养时间,获得大量菌丝体以备接种之用;比较两个干巴菌菌种在生理特性及不同基因片段序列上的区别;进行菌根合成试验。主要研究结果如下:1.通过组织分离法获得了松乳菇纯培养物,建立了一种新的分离法—空气传导分离法以获得干巴菌纯培养物。2.小哨乡的干巴菌分离物的最适培养条件为葡萄糖20g,蛋白胨2g,酵母提取物2g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾0.5g,初始pH5.5,水1L;来自玉溪的干巴菌分离物最适培养基为葡萄糖20g,硫酸铵4g,酵母提取物2g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾0.5g,初始pH5.5,水1L;松乳菇分离物的最适培养条件为葡萄糖10g,蛋白胨4g,酵母提取物2g,硫酸镁1g,磷酸二氢钾lg,PDA培养基1L。3.以rRNA ITS序列作为标记基因,对三个分离物进行了分子鉴定,确定分离物分别为干巴菌和松乳菇的菌丝体。干巴菌两个菌种在ITS基因片段上碱基序列无差异;12s RNA基因片段上碱基序列有1个位点的差异;16s RNA基因片段上碱基序列有2个位点的差异:TUB基因片段上碱基序列有1个位点的差异。4.菌根合成得到分别带有干巴菌及松乳菇菌根的云南松松苗。