论文部分内容阅读
心肌细胞胞内钙离子释放受体(包括ryanodine receptor以及InsP3receptor)对于心脏行使正常的生理功能是不可缺少的。心脏是胚胎发育中第一个形成并行使功能的器官。研究显示早在胚胎发育的7.5天,尽管在形态上还呈现为松散的细胞团,心脏就已经可以行使正常功能。研究表明胚胎心肌钙离子释放受体在自身的特性和生理功能方面与成年心肌钙离子释放受体有着显著的差异,同时以ryanodine receptor为基础的钙离子诱导的钙离子释放(CICR)以及兴奋收缩耦联(E-C coupling)机制在胚胎发育的早期也还没有建立起来。
我们在ICR小鼠不同发育时期的胚胎心脏作为模型研究了Ca2+释放受体的表达和功能。我们发现,这两种钙释放通道在胚胎发育时期存在表达和功能的变化:InsP3受体在胚胎发育早期,表达和功能上都表现得较为显著,随着发育不断减弱; Ryanodine受体的变化则表现出相反的模式,随着胚胎发育Ryanodine受体表达量持续上升,功能也不断提高。相应于钙离子释放受体表达的时间差异性,我们发现在胚胎心脏发育早期的钙离子释放事件的特征也与成年心肌细胞典型的钙火花(calcium spark)有着极为显著的差别。进一步的研究,我们确定了随着胚胎发育Ryanodine受体从早期的leak channel向功能性的release channel的转化,而InsP3受体在发育早期则参与到了自动节律性的调控。
我们进一步研究了兴奋收缩耦联机制是否已经存在于胚胎心脏中。我们的实验结果表明作为兴奋收缩耦联机制结构基础的肌质网已经出现了功能性的发育,JP-2以及cay-3这两个肌质网和细胞膜重要的耦联相关蛋白在胚胎时期已经有了显著的表达;另一方面细胞功能实验表明从胚胎发育中期开始钙火花自发发放的频率大为降低,而更大程度上依赖L型钙离子通道的控制,这些实验结果反映了兴奋收缩耦联机制在胚胎心肌细胞已经初步建立了起来,尽管在功能还是不成熟的。