大蒜提取物制备及其对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的保护作用研究

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大蒜既可以作为食物或佐料也可作为药材,在中国已有多年的历史。早在《本草纲目》中就有记载:大蒜“通五脏,达诸窍,祛寒湿,避邪恶,消痈肿”。近代研究表明,大蒜具有消除肿瘤、降低血压、降低血脂、降低血糖、预防血栓和保护肝脏功能,此外还有减肥、美容、戒烟等功效。国内已有研究表明大蒜多糖和蒜氨酸都具有保肝作用,但对大蒜肝损伤进行评估所选用指标过于简单。本研究先制备大蒜提取物,再用制备所得的大蒜提取物研究其对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的保护作用,具体研究内容如下:1.大蒜提取物的制备及蒜氨酸含量测定利用正交试验研究料液比、反应时间以及提取方式对大蒜提取物中蒜氨酸含量的影响,建立了一种对蒜氨酸进行定量的高效液相色谱方法,并用此方法测定了山东、四川、云南和河南四个大蒜主产地大蒜中蒜氨酸的含量。结果为,对大蒜提取物中蒜氨酸含量的影响,料液比>提取方式>反应时间。提取的最优条件是料液比1:4,搅拌提取10min,色谱条件为,使用C18色谱柱,流动相10%甲醇90%水,流速1mL/min,时间40min。山东、云南、四川三个地区的蒜氨酸含量都超过了1%,其中山东地区大蒜蒜氨酸含量最高,可以选用以上这地区的大蒜作为蒜氨酸提取的原料。2.大蒜提取物对四氯化碳诱导小鼠肝损伤的保护作用将76只6周龄无特定病原体(SPF)级ICR小鼠随机分为6组,空白对照组和模型组灌胃纯水,大蒜提取物低、中、高剂量组灌胃大蒜提取物,阳性对照组灌胃水飞蓟宾。连续给药14天,末次给药后,模型组及各给药组灌胃四氯化碳食用油溶液制备小鼠肝损伤模型,空白对照组灌胃食用油。检测小鼠血清和肝脏中总蛋白(Total Protein,TP)、白蛋白(Albumin,ALB)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)的含量和小鼠血清和肝脏中谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT)、乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)、肝脏中胆碱酯酶(Choline esterase,CHE)的活性。结果表明,大蒜提取物可以抑制四氯化碳导致的小鼠AST、ALT、LDH活性不正常升高,并抑制四氯化碳导致的小鼠TP、ALB、GSH含量不正常降低。实验结果初步表明,大蒜提取物通过提高GSH的浓度,以清除肝细胞内的氧自由基,提高肝细胞膜稳定性,来降低肝脏的损伤程度,使肝细胞的代谢合成水平接近正常水平。
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