目的：评估7-二氟甲氧基-5,4’-二甲氧基金雀异黄素(7-difluorome-thoxy-5,4’-dimethoxygenistein, dFMG)拮抗溶血性磷脂酰胆碱(lysop-hosphatidylcholine, LPC)和肿瘤坏死因子-a (tumorneerosis-faetore-a,TNF-a)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)损伤模型的保护作用,探讨其是否通过抑制CD40/CD40L相互作用,并且依赖下调环氧化酶2((cyclooxygenase-2, COX-2)蛋白的表达,从而减少单核细胞／内皮细胞黏附作用的研究。方法：体外培养人脐静脉内皮HUVE-12细胞,LPC(5,10,20μmo1／L)处理24h,探索并确定LPC诱导HUVE-12的CD40／CD40L表达所需的浓度。实验分组分为：空白组,溶媒对照组,以及用1.0、3.0μmo1／L的DFMG,1.0nmol/L的GEN,50μmo1／L的洛伐他汀预处理HUVE-12细胞30分钟,再与LPC孵育24小时。然后用双染色流式细胞术分析CD40、CD40L的表达,western blotting方法检测环氧化酶2(COX-2)的表达,E-选择素、单核趋化蛋白-1(Monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)定量检测试剂盒检测E-选择素、单核趋化蛋白-1(MCP-1)的释放,蛋白定量分析法测定内皮细胞与单核细胞的黏附率。1.体外培养人脐静脉内皮HUVE-12细胞,实验分组分为：空白组,溶媒对照组,以及用1.0、3.0μmol／L的DFMG,1.0μtmol／L的GEN,50μmol／L的洛伐他汀预处理HUVE-12细胞30分钟,再用20ng／ml的TNF-α孵育24小时。然后用双染色流式细胞术分析CD40、CD40L的表达,western blotting方法检测环氧化酶2(COX-2)的表达,E-选择素、单核趋化蛋白-1(MCP-1)定量检测试剂盒检测E-选择素、单核趋化蛋白-1(MCP-1)的释放,蛋白定量分析法测定内皮细胞与单核细胞的黏附率。结果：1.10μmol／L LPC孵育人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)24h,增加CD40、CD40L的表达,CD40的表达率为35.25±2.14%、CD40L的表达率为13.99±1.24%,可作为后续实验中LPC诱导HUVE-12细胞凋亡模型的最佳造模浓度。查阅参考文献[41,42],实验表明20ng／ml的TNF-α孵育人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)24h后CD40、CD40L表达增加,CD40的表达率为35.56±2.39%、CD40L的表达率为12.35±1.89%,可作为后续实验中TNF-α诱导HUVE-12细胞凋亡模型的最佳造模浓度。2.流式结果显示：1.0、3.0μmo1／L的DFMG使LPC和TNF-α诱导HUVE-12细胞CD40、CD40L表达减少,与10μmol／L LPC和20ng／ml的TNF-a模型组比较,差异具有统计学意义(P<0.001),且作用呈浓度-效应依赖性；较1.0μmol／L的GEN组减少CD40、CD40L的表达的作用稍强(P>0.05),但3.0μmol／LDFMG与50μmol/L洛伐他汀组相比无统计学差异,抑制作用相同(P>0.05)。3. western blotting结果显示：与空白组、溶媒组相比,10μmol/LLPC和20ng/ml的TNF-α使HUVE-12细胞环氧化酶-2(COX-2)的表达上调(P<0.001),DFMG呈浓度依赖性地拮抗LPC和TNF-α诱导的HUVE-12细胞环氧化酶-2(COX-2)的表达,相同浓度的DFMG作用稍强于GEN,但3.0μmol/LDFMG与50μmol/L洛伐他汀组相比无统计学差异,抑制作用相同(P>0.05)。4. ELISA结果显示：与空白组、溶媒组相比,10μmol/L LPC和20ng/ml的TNF-α使HUVE-12细胞E-选择素、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达上调,DFMG呈浓度依赖性地拮抗LPC和TNF-α诱导的HUVE-12细胞E-选择素、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的表达(P<0.001),相同浓度的DFMG作用稍强于GEN,但3.0μmol/L DFMG与50μmol/L洛伐他汀组相比无统计学差异,抑制作用相同(P>0.05)。5.内皮细胞与单核细胞的黏附率结果显示：与空白组、溶媒组相比,10μmol/LLPC和20ng/ml的TNF-α使内皮细胞与单核细胞的黏附率升高,DFMG呈浓度依赖性地拮抗LPC和TNF-α诱导的HUVE-12细胞的内皮细胞与单核细胞的黏附率,相同浓度的DFMG作用稍强于GEN,但3.0μmol/LDFMG与50μmol/L洛伐他汀组相比无统计学差异,抑制作用相同(P>0.05)。结论：DFMG拮抗LPC、TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)损伤模型的保护作用与抑制CD40／CD40L相互作用,并且依赖下调环氧化酶2(COX-2)蛋白的表达,从而减少单核细胞／内皮细胞黏附作用相关。