酶处理的啤酒废酵母干预糖尿病小鼠效果评价

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本课题主要探究了啤酒废酵母提取液经过葡甘聚糖酶处理后理化特性的变化,通过抗氧化能力分析、观察酵母细胞壁形态等,确定最佳加酶方式以及其处理后的干预物对STZ诱导的糖尿病小鼠的影响。首先,本实验以啤酒生产中的副产物酵母菌体为原料,研究葡甘聚糖酶对酵母自溶过程和产物性质的影响。比较了三种酵母自溶体系,一是无加酶条件下酵母的自溶,二是酵母自溶过程中添加葡甘聚糖酶,三是酵母自溶结束后添加等活力葡甘聚糖酶。结果表明:与不加酶比较,两种加酶方式均可在一定程度上促进酵母细胞的自溶,酵母的自溶导致其形态极度凹陷,自溶物中固形物含量增加,自溶物抗氧化能力1,—二苯基一2—三硝基苯肼(DPPH·)清除率由不加酶的29.9%分别提高至自溶过程中加酶的75.0%和自溶后加酶的77.8%,2’-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS+)清除率也相应地由38.7%分别提升至67.8%和89.5%。溶出物中的多糖分子量分布测定表明不加酶的酵母自然自溶多糖产物分子量为最大,加酶均导致自溶产物中的多糖分子量显著性降低。试验结果进一步表明自溶后加酶方式在溶出物含量、抗氧化能力等指标均优于自溶过程中的加酶方式,并且前者的溶出物中产物的分子量分布更为集中。动物实验中,本实验以昆明小鼠为研究对象,旨在研究自溶后加酶处理的啤酒废酵母上清和沉淀对STZ诱导的糖尿病小鼠糖脂代谢、氧化应激以及肝功能酶方面的影响。并利用荧光定量实时PCR技术测定受试物对糖尿病小鼠脂代谢、氧化应激等相关基因mRNA转录水平的影响,并且分析了啤酒酵母上清和沉淀对糖尿病小鼠相关代谢调节的差异性以及相关的调控机制。血清结果表明:小鼠血清相关生理生化指标显示,啤酒酵母上清和沉淀均可在一定程度上改善糖尿病小鼠血脂代谢紊乱、氧化应激损伤以及肝功能酶损伤等方面的代谢紊乱,其中啤酒酵母上清调节由糖尿病引起的高血糖症,氧化应激损伤方面表现突出,并且其能显著增强机体的抗氧化能力,平衡饮食,提高病变小鼠的健康状况。分子生物学实验结果表明,通过对小鼠肝组织脂代谢(PPARa、CPTla、HMG-COA、LDLR)以及氧化应激(Trx1、HIF-1α、HO-1)等相关基因mRNA转录水平的测定,干预物能显著改善小鼠脂代谢及氧化应激相关基因转录水平,深入剖析了干预物对相关基因的调控途径和机理。不仅为将来啤酒生产过程中产生的废弃酵母的综合利用提供了有力依据,更为减缓糖尿病症状的饮食干预物提供了一种新的可能。
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