金针菇担孢子核相及遗传属性的研究

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以3个不同的金针菇菌株为材料,研究了其担孢子的核相及遗传属性。荧光染色观察显示,担孢子核相以双核为主,双核孢子、单核孢子和无核孢子分别占80.2%、7.5%和12.3%。源于单孢分离物的菌丝为有隔膜、无锁状联合的多核菌丝。研究了3种不同荧光染料对担孢子及其萌发菌丝的适宜染色条件。试验结果显示,担孢子的适宜染色条件为Hoechest33258浓度60μg/mL~80μg/mL、染色时间3min~5min,DAPI浓度6μg/mL、染色时间3min~5min;单孢萌发菌丝的适宜双重染色条件为,先用70μg/mL的Hoechest33258染色4min,再用3μg/mL的FluorescentBrightener28染色4min。对单孢萌发菌丝原生质体化条件进行了初步研究,当使用的溶壁酶浓度为2%,用量为每克菌丝2mL时,综合考虑原生质体产量和再生率,确定单孢萌发菌丝最适宜的酶解温度为30℃,酶解时间为3h。在交配试验中,源于不同菌株单孢分离物的菌丝原生质体的配对形成具锁状联合的菌落,而源于同一单孢分离物的菌丝原生质体的配对则形成无锁状联合的菌落,暗示担孢子中的两个核具有相同的交配型。RAPD分析显示,源于同一单孢分离物的菌丝原生质体为10个随机引物所扩增的图谱彼此完全相同,印证了担孢子中的双核是同质的。此外,观察表明,一个担子上着生有4个担孢子。因此,金针菇是一种具4个含同质双核担孢子的四极性蕈菌。
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