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卵巢肿瘤(ovarian tumor)作为一种常见的妇科恶性肿瘤,全球5年死亡率已高达60%-70%,成为致死率最高的妇科肿瘤,严重威胁着女性的健康与生命安全。随着中国社会发展和人们生活方式的改变,卵巢肿瘤的发病率和死亡率均呈快速上升的态势,在未来数年内将仍是威胁女性健康的主要疾病之一。卵巢肿瘤具有发病隐匿性,早期无典型症状的特点,确诊时多数已处在肿瘤晚期,这就迫切需要科研工作者在卵巢肿瘤的早期预警诊断方面进行更加深入的研究。有报道,钙的摄入量与卵巢肿瘤的发生成正相关性。细胞内Ca2+主要通过细胞膜上分布的多种钙通道蛋白进出细胞,雷诺丁受体钙通道(ryanodine receptor, RyR)已被证实在维持细胞内钙稳态方面起着重要作用。本文通过探究与细胞第二信使Ca2+密切相关的细胞内外蛋白,即钙通道蛋白复合体的系列调节蛋白、FNs家族蛋白、细胞骨架蛋白和癌基因表达蛋白在卵巢肿瘤中的表达模式,为研发有效的早期预警诊断标志物提供一定的实验依据和理论基础。本硕士论文以小鼠卵巢肿瘤为研究对象,将囊性卵巢肿瘤(ovarian tumor, OvT)分为两个部分,卵巢肿瘤实体组织部分(solid, ovarian tumor, OvT-sol)和肿瘤液体部分(liquid, ovarian tumor, OvT-liq),采用Western Blot方法检测钙通道蛋白RyR的调节蛋白CAMR1、CAMR2、PP2A家族,细胞外基质FNs家族蛋白,以及钙粘蛋白N-cadherin,细胞骨架蛋白(3-tubulin, p53和PTEN表达蛋白,比较这些蛋白在这两个组织部分中的表达变化。通过RT-PCR法检测CAMR1和CAMR2在小鼠正常卵巢和卵巢肿瘤中mRNA水平上的表达。采用常规染色方法HE.PASM和Masson分析卵巢肿瘤的组织学病理变化。以N-cadherin为对照,利用免疫组织化学染色方法检测CAMR1和CAMR2蛋白在正常卵巢中的表达分布,并确定了它们在卵巢肿瘤中的表达变化。结果如下：(1)RT-PCR检测显示,在mRNA水平上CAMR1和CAMR2蛋白在卵巢肿瘤和正常卵巢中均有表达。(2)组织形态学常规染色显示,与正常卵巢组织相比卵巢肿瘤组织在结构上已发生明显病理变化,卵泡明显萎缩、破坏甚至消失,细胞核增大,血管、淋巴管和脂肪组织增多,肿瘤细胞弥散分布,基膜结构发生缺损,结构松散,基膜线条和胶原纤维增多,基膜染色加深,表明肿瘤纤维化程度增加。(3)免疫组化分析显示,在正常卵巢组织中CAMR1和CAMR2蛋白表达量较低,主要分布于发育各时期的卵泡和卵巢支持组织中,但在卵巢肿瘤组织中的表达均有上升,多定位于胞质和淋巴管部位；N-cadherin在正常卵巢组织中高表达,主要分布于卵泡细胞各个细胞间的细胞膜上,在卵巢结缔组织中则分布于细胞周边,但在卵巢肿瘤组织中,N-cadherin的表达降低乃至消失。(4)Western Blot对目的蛋白的定量表达水平检测显示,RyR调节蛋白CAMR1在卵巢肿瘤全部组织(OvT)和OvT-sol中表达显著上调,而在液体组织中无明显变化；CAMR2在卵巢肿瘤组织中的表达均显著高于正常卵巢组织,特别在OvT-sol中表达最高,这与免疫组化染色结果相一致；PP2A三个亚基的表达不尽相同,PP2AA和PP2AB在卵巢肿瘤组织中的表达均显著高于正常卵巢组织；PP2A B55的表达也显著高于正常卵巢组织,但在OvT-liq中该蛋白表达较低,要显著低于OvT和OvT-sol;PP2AC在卵巢肿瘤组织中的表达却均出现显著下调,特别是在OvT-liq中表达最低,显著低于OvT和OvT-sol。细胞外基质蛋白FN-1和FN-2在卵巢肿瘤组织中的表达均显著上调,在OvT-liq中的表达上调程度要显著低于OvT和OvT-sol; FN-3在卵巢肿瘤OvT和OvT-liq中的表达要低于正常卵巢组织,但无显著性差异,在OvT-sol中FN-3的表达要显著低于正常卵巢组织；FN-4在卵巢肿瘤组织中的表达与正常卵巢组织相比无显著性差异；FN-5在卵巢肿瘤OvT中的表达要显著高于正常卵巢组织,但在OvT-sol和OvT-liq中均无显著性变化。细胞骨架蛋白P-tubulin在卵巢肿瘤组织中的表达与正常卵巢组织相比虽有上升趋势,但无显著性差异；钙粘蛋白N-cadherin在卵巢肿瘤组织中的表达均显著低于正常卵巢组织；P53和PTEN在卵巢肿瘤组织中的表达均显著高于正常卵巢组织,但在OvT-liq中的表达上调程度要显著低于OvT。结论：本研究系统地对钙通道蛋白复合体PyR的调节蛋白、细胞外基质FNs家族蛋白、钙粘蛋白N-cadherin、细胞骨架蛋白β-tubulin和癌基因表达蛋白在小鼠卵巢肿瘤中的表达水平进行了研究,对后续在细胞及分子水平上进行的卵巢肿瘤相关研究具有一定实际意义。通过免疫组化、RT-PCR和Western Blot检测到在小鼠卵巢肿瘤中CAMR1和CAMR2在mRNA和蛋白水平上均有表达,可能参与了卵巢肿瘤发展过程中的调控,可能成为卵巢肿瘤早期诊断的生物标志物。PP2AA、 PP2AB、PP2AB55、FN-1、FN-2、FN-5、P53和PTEN在卵巢肿瘤中的表达上调以及PP2AC和N-cadherin的下调预示着钙可能与卵巢肿瘤的发生有关,并有可能成为潜在生物标志物应用于卵巢肿瘤的早期诊断中。因此,本研究可以为卵巢肿瘤的早期诊断与治疗方面的研究提供有价值的信息与新的途径。