海洋灰绿曲霉HB1-19具有海洋菌的典型特征，能够耐受高盐环境。前期研究发现人工海水能够促进海洋灰绿曲霉进行无性发育，同时也明显地促进了抗肿瘤次级代谢产物灰绿霉素A的合成。因此，我们推测海洋灰绿曲霉的无性发育利于灰绿霉素A的合成。由于真菌的发育和次级代谢密切相关，基于上述现象我们尝试在海洋灰绿曲霉中探索盐度胁迫、发育和次级代谢之间的关系，并寻找新的方法促进灰绿霉素A的合成。　　首先，通过简并PCR和染色体步移技术在海洋灰绿曲霉中克隆得到无性发育途径中五个关键基因——AgfluG、AgbrlA、AgabaA、AgwetA和AgvosA。为了排除人工海水中其他离子的影响，我们后续研究采用三种条件，即去离子水、人工海水和NaCl溶液（人工海水等渗溶液）。在黑暗条件下，保证培养基基础配方相同，海洋灰绿曲霉在NaCl溶液条件下主要进行无性发育生成灰绿色的分生孢子，人工海水条件下除了生成大量的分生孢子还有极少的子囊果形成，去离子水条件下主要进行有性发育生成大量黄色的子囊果。通过实时荧光定量PCR发现，相关基因的转录在前期较强且区别明显，氯化钠显著促进了这五个基因的转录，转录水平明显增强;然而与氯化钠不同，人工海水由于多种离子的存在，基因转录比去离子水的条件稍强。在固体培养时，灰绿霉素A在人工海水条件下产量最高，其次是去离子水，氯化钠条件下产量最低，这与无性发育利于灰绿霉素A合成的推测是相矛盾的。我们认为人工海水促进灰绿霉素A的合成很可能是由于人工海水中金属离子影响了次级代谢而不是由于无性发育的增强。　　为进一步探索发育和灰绿霉素A合成之间的关系，我们构建了AgB14菌株(基因型alcA(p)∷AgbrlA)。构巢曲霉alcA启动子在葡萄糖条件下受抑制，甘油条件下组成型表达，苏氨酸及乙醇条件下诱导型表达，期望通过调控无性发育相关基因的不表达及过表达来探索发育和灰绿霉素A合成之间的关系。但是，通过基因转录分析发现，alcA启动子在三种条件下均没有有效启动，这可能与构巢曲霉alcA启动子与海洋灰绿曲霉中AlcR调控蛋白的不匹配有关。当AgbrlA基因不能表达时，该重组菌株不能进行无性发育而只能进行有性发育，说明AgbrlA基因控制海洋灰绿曲霉的无性发育，是分生孢子形成的关键基因，与构巢曲霉中结果一致。而且，该重组菌进行有性发育时，灰绿霉素A的生成量在去离子水、人工海水和NaCl溶液（人工海水等渗溶液）三种条件下都明显高于野生菌。这表明在海洋灰绿曲霉并非无性发育而是有性发育更利于灰绿霉素A的合成，同时为促进灰绿霉素A的合成提供了新的调控思路。