天麻多糖的结构分析及ACE抑制活性研究

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天麻(Gastrodia elata Blume)作为名贵中药之一,属于兰科天麻属,用于治疗小儿惊风、头晕目眩、高血压等病症。鉴于天麻有效成分的研究多集中于天麻素,而对多糖的研究相对较少。故本文以天麻作为原材料,较为系统的研究了天麻多糖的提取、分离纯化、结构表征及其理化性质,并对其体外ACE抑制活性进行了评价,主要研究结果如下:结合单因素实验和响应面实验对天麻多糖提取工艺进行了优化,确定了最佳工艺条件为:提取温度60℃、提取时间2 h、料液比1:50(g/mL),在此条件下天麻多糖提取得率为15.81%。采用水提醇沉法得到粗多糖,运用酶-Sevag法结合,SephadexG-200与超滤管结合对其进行分离纯化,获得均一组分多糖(PGE)。采用高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计、傅里叶变换红外光谱仪、核磁共振波谱仪、旋光仪、差示量热扫描仪、热重分析仪、扫描电镜、高碘酸氧化-Smith降解、刚果红实验、甲基化等分析方法和仪器,对PGE进行初步结构表征和理化性质的鉴定。结果表明:PGE是不含核酸、蛋白质和淀粉的中性多糖,具有良好的热稳定性;其分子量约为1.54×103kDa,单糖组成分析是由D-葡萄糖组成,比旋光度为+155°,不具有三股螺旋结构;PGE为α-型右旋糖,糖环构型为吡喃型,糖苷键连接方式主要以1→4链接的葡萄糖为主链,分支可能存在1→3链接的葡萄糖、1→4,6链接的葡萄糖和1→链接的葡萄糖末端。在体外血管紧张素转化酶(ACE)活性抑制研究试验中,以药物卡托普利作为阳性对照,探究天麻多糖对ACE的抑制作用。结果发现随着多糖浓度的增大,ACE的抑制率也随之加强,并呈现一定的剂量相关性,其IC50为0.66mg/mL。
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