【摘 要】
：
目的:探究卡博替尼降解突变p53Y220C蛋白的机制,评估卡博替尼降解突变p53Y220C在高级别浆液性卵巢癌治疗中的作用。方法:利用免疫印迹、免疫荧光、RT-PCR等实验技术探究卡博替尼对突变p53Y220C表达水平的影响;通过CHX示踪实验、CO-IP实验阐明卡博替尼降解突变p53Y220C的途径;通过分子对接、分子动力学模拟以及质谱实验探究卡博替尼降解突变p53Y220C的机制;最后通过MT
论文部分内容阅读
目的:探究卡博替尼降解突变p53Y220C蛋白的机制,评估卡博替尼降解突变p53Y220C在高级别浆液性卵巢癌治疗中的作用。方法:利用免疫印迹、免疫荧光、RT-PCR等实验技术探究卡博替尼对突变p53Y220C表达水平的影响;通过CHX示踪实验、CO-IP实验阐明卡博替尼降解突变p53Y220C的途径;通过分子对接、分子动力学模拟以及质谱实验探究卡博替尼降解突变p53Y220C的机制;最后通过MTT、流式凋亡检测以及裸鼠皮下瘤模型等方法评估卡博替尼在携带突变p53Y220C的高级别浆液性卵巢癌治疗中的作用。结果:在本研究中,我们确定了小分子酪氨酸激酶抑制剂卡博替尼可选择性降解突变p53Y220C蛋白,对野生型p53和其他突变p53无明显影响。机制研究发现:卡博替尼通过与突变p53Y220C相互作用诱导突变体p53Y220C的构象变化,增加K373位点的泛素化修饰,从而导致突变p53Y220C泛素-蛋白酶体途径降解;质谱检测发现卡博替尼可以影响突变p53Y220C与USP7的结合,减弱了 USP7对突变p53Y220C的去泛素化修饰作用,增强了 E3泛素连接酶CHIP对突变p53Y220C的泛素化修饰作用,从而影响突变p53Y220C的稳定性。最后,我们发现携带p53Y220C突变体的高级别浆液性卵巢癌细胞对卡博替尼治疗更敏感,并可以显著抑制携带p53Y220C突变体的高级别浆液性卵巢癌细胞皮下瘤的生长,同时在体内可以降解突变p53Y220C。结论:卡博替尼可诱导K373位点的泛素化修饰增加,从而导致突变p53Y220C泛素-蛋白酶体途径降解;卡博替尼破坏USP7与突变p53Y220C的结合,使其去泛素化修饰作用减弱,增加了CHIP对其泛素化修饰作用,稳定性降低;卡博替尼通过降解突变p53Y220C对携带突变p53Y220C的高级别浆液性卵巢癌细胞系以及皮下瘤模型治疗敏感。
其他文献
背景与目的中枢神经系统（CNS）转移癌的发病率和死亡率都要高于CNS中其它的恶性肿瘤。非小细胞肺癌（NSCLC）大约占CNS转移的25%-30%,位居CNS转移癌的首位,其中45%以上是接受过靶向治疗的患者,在3年内发生了 CNS转移。CNS转移癌可能与其他转移癌的进展模式有所不同,如脑转移癌与肝转移癌相比,脑转移癌的基因突变更加多样化,这可能与NSCLC细胞不同寄生地的组织类型有关。NSCLC细
第一部分 急性髓系白血病部分分化型患者的临床特点分析目的:探讨急性髓系白血病部分分化型患者的临床特征及预后影响因素,为急性髓系白血病部分分化型患者的治疗和判断预后提供依据。方法:回顾性分析2013年1月-2018年12月在我院初诊的371例急性髓系白血病部分分化型患者的年龄、性别、外周血象、免疫表型、基因突变等临床资料,评估化疗后患者的治疗效果,并对患者进行长期随访,分析总生存期和无事件生存期的影
第一部分三维剪切波弹性成像在鉴别诊断乳腺良恶性结节中的应用价值研究目的:探讨三维剪切波弹性成像（three-dimensional shear wave elastography,3D-SWE）定量参数与定性指标“硬环征”在鉴别乳腺良恶性结节中的应用价值。研究方法:对2020年1月至2021年7月于苏州大学附属第一医院收治的153例（156个结节）女性乳腺结节患者行常规超声、二维剪切波弹性成像（t
背景:铂类抗肿瘤药物是目前引起药物性肾损伤的主要因素之一,其引起药物性肾损伤的核心机制与患者预后直接相关。本研究旨在通过临床及基础工作明确相关机制并为其进一步临床应用提供依据。通过临床研究验证铁死亡及氧化应激为铂类抗肿瘤药物肾毒性的关键机制;通过基础研究验证在顺铂致小鼠急性肾损伤模型中使用芪归益肾方剂前干预可通过调控铁死亡及氧化应激相关信号通路,达到抑制肾组织铁死亡、缓解氧化应激损伤进而减轻铂类抗
目的:探讨肩袖损伤（rotator cuff tear,RCT）患者肩周肌肉的激活改变情况,并测量相关肌肉的横截面积（cross-sectional area,CSA）大小,进一步探讨其生物力学关系改变,为康复治疗方案的选择提供理论依据。方法:第一部分,使用表面肌电图（surface electromyographic,sEMG）收集48例RCT患者及15例健康志愿者两侧肩部三角肌前束（anter
研究目的:探究与心房颤动患者行导管射频消融术（RFCA）后房颤复发相关的独立危险因素,并以此为基础建立Nomogram模型,将其与已知常用的临床预测评分进行比较,从而评估其预测价值。资料和方法:本研究回顾性纳入2018年1月至2020年1月至苏州大学附属第一医院首次行RFCA的心房颤动（房颤）患者574例,其中152例（26.5%）患者术后出现复发（复发组）,其余422例（73.5%）患者未出现复
目的:设计合成一种具有安全性、主动靶向性、pH敏感性的多功能纳米聚合物,用于高效递送CRISPR/Cas9质粒进入肿瘤细胞,发挥基因编辑作用,下调甲基转移酶样3（Methyltransferase-Like3,METTL3）蛋白表达,抑制肝癌细胞增殖,发挥肝癌治疗作用。并进一步探究RNA的m6A修饰表观遗传学在肿瘤增殖发展方面的作用。方法:（1）利用酰胺化反应合成多功能纳米聚合物（sPEG-LPD
有机阴离子转运多肽（OATP）是重要的介导药物及内源性物质跨膜转运的蛋白。OATP1B1是其重要的一员,OATP1B1转运的底物十分广泛,包括他汀类药物、抗肿瘤药物、降血糖药物等外源性物质,也包括胆汁酸、雌二醇-17-β-D-葡萄糖醛酸等内源性物质。临床研究表明OATP1B1在人群中呈现较高频率的基因多态性,且多态性可能会影响OATP1B1的转运功能,导致该类患者服药后的不良反应。我们构建了人群中
猪肉向来是餐桌上的必需品。猪肉的品质与猪只的养殖方式有着直接的联系。目前,现有的猪只健康检测大多采用人工的方式检查,这样的方式不仅会增加人力物力成本,而且易于危害人体的身体健康。因此,本文提出基于Yolov5算法的猪只健康检测系统,旨在利用深度学习进行猪只跟踪,对猪只的运动量进行等效计算,通过猪只的运动量可以分析出不同猪只的活跃状况。猪只的健康状况与其本身的活跃状态密不可分,由此实现对猪只健康状况